螢光定量PCR擴增曲線基線過高什麼原因

2021-03-04 09:00:59 字數 1194 閱讀 7724

1樓:zd混混

rox加多了,終濃度太高?

或者模板量,pcr擴增效率低下?

2樓:小痕求解

模板量的問題,改一下試試

3樓:匿名使用者

你的背景太高了,降低探針用量!

螢光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題

4樓:南京金益柏生物科技****

在螢光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增

螢光定量pcr擴增曲線基線過高什麼原因

5樓:匿名使用者

最常見的是樣本的擴增效率很差,所以到了平台期也不是很強,這樣基線就相對很高了。

螢光定量pcr擴增曲線基線過高什麼原因

6樓:龍鳳油洺月

探針濃度過高;

體系中有螢光物質汙染;

擴增效率低

7樓:匿名使用者

我師兄用biog螢光定量pcr試劑盒擴增效果特別好,曲線非常典型,反應速度也很快,沒有遇到這個問題

螢光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題

8樓:首暢郎凌雪

在螢光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增

螢光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題?

9樓:卡哇伊o0小櫻

在螢光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增

10樓:匿名使用者

可以看出是否有雜合的基因片段

11樓:匿名使用者

說明模板的濃度。。。

螢光定量pcr和實時螢光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀?有什麼區別,分別是什麼作用啊?謝謝啊

實時就是指每個階段的螢光都有收集,其實現在所有的螢光定量pcr儀器都是實時的。螢光定量pcr的英文簡寫是 fq pcr,f是螢光的縮寫,q是定量的縮寫。或者寫成是rt pcr。rt就是realtime的縮寫 做定量pcr的目的是為了了解起始模板數的量,這個一下寫不清楚,你看乙個說明書絕對看得懂。而反...

怎麼判斷實時螢光定量PCR標準曲線是否準確

看標準曲線是否反映出了標準物質的真實濃度 實時螢光定量pcr曲線怎麼分析 看螢光背景 看擴增曲線形態 s 看ct值 靠擴增效率 實時螢光定量pcr可以用來精確測定dna濃度嗎 實時螢光定量pcr不是用來測濃度的,可以用來做基因的拷貝數。但是如果你的產物單一,有相應的標準品,也是可以測濃度的,濃度的準...

螢光定量pcr的相對定量怎麼用,螢光定量PCR的相對定量怎麼用

管家基因是用來定量的。用來計算相對表達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。然後根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每乙個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取rna以後用dnase處理樣品。如果不放心,可以拿處理過的rna做膜版,跑一次,如果有帶就是有汙染,如果沒有可...