1樓：常映寒黃彥
區別
如果rt-pcr的擴增產物只有1,200bp，而且足夠保守可以定位螢光pcr的目的基因
那就可以通用
2樓：奉俏麗奈鯨
實時定量的引物設計要求比較高,可以按普通引物設計的方法來做,但是設計時要注意擴增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之間.同時要保證這對引物有絕對的特異性,因為要是產生非特異性擴增的話,就不能準確的計量模板量了,這樣就失去了實時定量的意義了
3樓：僪文賦板惠
普通rt-pcr是半定量的。。即需要從條帶的亮度判斷量的相對多少。。
螢光定量pcr是定量的。。
因為兩者反應體系，要求有很大區別，引物通常不能通用。除了上面提到的螢光定量pcr產物要控制在60-200nt之間，退火溫度也比較高。。一般要達到60度
普通rt-pcr與實時螢光定量pcr的引物有什麼區別
4樓：匿名使用者
實時定量的引物設計要求比較高,可以按普通引物設計的方法來做,但是設計時要注意擴增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之間.同時要保證這對引物有絕對的特異性,因為要是產生非特異性擴增的話,就不能準確的計量模板量了,這樣就失去了實時定量的意義了
rt-pcr與螢光定量 pcr有什麼區別
5樓：朵向日葵熊
實時螢光定量pcr技術，是指在pcr反應體系中加入螢光基團，利用螢光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
pcr(聚合酶鏈式反應）是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°c左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度（72°c左右），dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
恆溫pcr和實時螢光定量pcr的不同，是不同在實時螢光定量pcr的系統中加入了螢光染料（sybr green 或taqman 探針等等）。以sybr green為例，這種染料可以結合在雙鏈的dna上，當pcr不斷進行時，每一次退火生成的雙鏈dna也在增加，螢光染料結合也越多，螢光也越強。在機器中有乙個探測螢光的探頭，可以定量檢測螢光的強度，轉換成數值。
這樣就可以實時記錄反映體系中dna的反應情況。
螢光pcr更有優勢，因為螢光pcr靈敏度高於恆溫pcr，同樣**也高一些。
pcr,rt-pcr,實時螢光定量pcr的區別與聯絡
6樓：永恆的瞬間綻放
1、所說的pcr應該就是最常規的pcr，以dna為模板，通過上下游引物，實現dna的擴增。
2、rt-pcr一般情況下是指反轉錄pcr（reverse transcription），儘管有些資料上說實時螢光定量pcr也（realtime fluores-cence quantitative pcr）也簡稱rt-pcr，但是這是不對的，不推薦。
基本操作過程是將所提取的rna進行反轉錄，然後將所獲得的cdna作為模板，設計引物進行擴增，是一種檢測基因表達的常用方法。
3、實時螢光定量pcr也就是real-time pcr，其最大的作用是檢測樣品中的初始dna濃度。
至於三者的關係，rt-pcr和實時定量pcr應該都屬於pcr，在rna實驗中，這二者都會應用到。
例如你要比較2個組織中的某基因的表達差異，首先你要提取2個組織的總rna，然後通過rt-pcr檢測該基因是否在2個組織中有表達，然後通過實時定量pcr測定該基因在2個組織中的表達量是否具有顯著性差異。
擴充套件資料：
pcr原理
dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在dna聚合酶的參與下，根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。
在實驗中發現，dna在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制dna的變性和復性，加入設計引物，dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。
但是，dna聚合酶在高溫時會失活，因此，每次迴圈都得加入新的dna聚合酶，不僅操作煩瑣，而且**昂貴，制約了pcr技術的應用和發展。
耐熱dna聚合酶-taq酶的發現對於pcr的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個迴圈加酶，使pcr技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，pcr技術得以大量應用，並逐步應用於臨床。
pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成：
①模板dna的變性：模板dna經加熱至93℃左右一定時間後，使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；
②模板dna與引物的退火（復性）：模板dna經加熱變性成單鏈後，溫度降至55℃左右，引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合；
③引物的延伸：dna模板-引物結合物在72℃、dna聚合酶（如taqdna聚合酶）的作用下，以dntp為反應原料，靶序列為模板，按鹼基互補配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈，重複迴圈變性-退火-延伸三過程就可獲得更多的「半保留複製鏈」，
而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成乙個迴圈需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
螢光定量pcr和實時螢光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀？有什麼區別，分別是什麼作用啊？謝謝啊
實時就是指每個階段的螢光都有收集，其實現在所有的螢光定量pcr儀器都是實時的。螢光定量pcr的英文簡寫是 fq pcr，f是螢光的縮寫，q是定量的縮寫。或者寫成是rt pcr。rt就是realtime的縮寫 做定量pcr的目的是為了了解起始模板數的量，這個一下寫不清楚，你看乙個說明書絕對看得懂。而反...
螢光定量pcr的相對定量怎麼用,螢光定量PCR的相對定量怎麼用
管家基因是用來定量的。用來計算相對表達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。然後根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每乙個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取rna以後用dnase處理樣品。如果不放心，可以拿處理過的rna做膜版，跑一次，如果有帶就是有汙染，如果沒有可...
請問B肝HBV DNA實時螢光定量PCR檢測結果2 47E
就是說你現在一毫公升血裡有24700000個B肝病毒，而正常的是100個 這是病毒複製量，2.47乘以10的8次方。比較高。hbvdnaB型肝炎病毒測定結果7.029e 07 5.000e 02是什麼意思？B肝病毒hbv dna定量 檢測方法，實時螢光定量pcr 結果7.82e 02 最低檢測下限5...