1樓：阿魯巴星人
ls說得很對
你可以手動改動幾個鹼基，降低引物裡面的dimer，主要是3'端沒有dimer就好。
錯配問題，可以用taqman探針來檢測，但是很貴，實在設計不出來再用。
可以多設計幾對，然後做個引物測試，挑選出幾對好的，再做qrt。
2樓：匿名使用者
你是直接用primer5設計的引物嗎？有時候時會遇到你說的問題，你可以在軟體設計出來的基礎上，手動的把你的引物移動幾個鹼基，可以減少一些二聚體或錯配，而且，軟體給出來的這些結果都只是計算值，你實際應用的時候，退火溫度都要五六十度了，即使有部分二聚體在這個溫度下也開啟了，如果害怕出問題，你可以針對同一轉錄組多設計幾對引物，然後選一組最好的用
普通RTPCR與實時螢光定量PCR的引物有什麼區別
區別 如果rt pcr的擴增產物只有1,200bp，而且足夠保守可以定位螢光pcr的目的基因 那就可以通用 實時定量的引物設計要求比較高,可以按普通引物設計的方法來做,但是設計時要注意擴增的片段不能太大,最好在250bp 100bp之間.同時要保證這對引物有絕對的特異性,因為要是產生非特異性擴增的話...
螢光定量pcr和實時螢光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀？有什麼區別，分別是什麼作用啊？謝謝啊
實時就是指每個階段的螢光都有收集，其實現在所有的螢光定量pcr儀器都是實時的。螢光定量pcr的英文簡寫是 fq pcr，f是螢光的縮寫，q是定量的縮寫。或者寫成是rt pcr。rt就是realtime的縮寫 做定量pcr的目的是為了了解起始模板數的量，這個一下寫不清楚，你看乙個說明書絕對看得懂。而反...
螢光定量pcr的相對定量怎麼用,螢光定量PCR的相對定量怎麼用
管家基因是用來定量的。用來計算相對表達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。然後根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每乙個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取rna以後用dnase處理樣品。如果不放心，可以拿處理過的rna做膜版，跑一次，如果有帶就是有汙染，如果沒有可...