螢光定量pcrct值每次重複相差多少

1樓：

如果有標準曲線，按照標準曲線計算。

一般都是相對量。則用delta delta ct方法來計算。舉例如下：

對照組基因a的ct值為20，內參（比如βactin)ct值15。實驗組基因a ct值18，內參ct值14。首先算加樣量：

delta ct=15-14=1。2的1次方是2。也就是說。。

實時螢光定量pcr資料如何統計？

2樓：匿名使用者

首先你這樣做出來的統計沒有意義。

應該是至少3次獨立實驗，而不是重複3次pcr。

如果3次試驗，每次重複3次（取平均值算一次）。然後先定各個基因在對照組的值為一，再算出其他組該基因的相對量，比如內參ct值一樣（都是15），而tnf的ct值對照組是20，而模型組是19，則相對量是2 （對照組為1）。△△ct=（19-15）-（20-15）= -1， 2-△△ ct= 2。

以此類推。

其實你只有3組，2個基因。用anova先算，然後再用t test就可以了。結果表達為tnf：

對照組1，模型組想x± d, 藥物組y± d. nf-kb: 對照組1，模型組想x± d, 藥物組y± d.

tnf和nf-kb間不需要比較。

請參考我發表的文章：

如果你提供email, 我可以發全文給你。

螢光定量pcr中關於閾值的設定是否會影響ct值？

3樓：匿名使用者

閾值和基線的設定肯定會影響ct值，你可以採用每次反應完後軟體自己選定的閾值。你也可以手動調整，但是如果你是相同的模板，做不同反應，那你必須使兩次實驗的閾值和基線調到相同。使用相同的標準品，才能減小不同批次反應的誤差。

4樓：

閾值和基線的設定是會影響ct值的，一般儀器會自動對基線和閾值進行優化，一般選用儀器上的設定就可以了。

但有些時候也需要調整，主要根據標準曲線上的斜率，擴增效率和r2值進行調整，將斜率調到合適的位置即可。

當然也可以在每次進行實驗時設定1-2個內參，根據內參調整引數。