1樓：謇有福及子
pcr引物和測序引物是可以通用的，最多是純化方式不一樣，測序的要求高一些。版
權最重要的是，pcr擴增是從引物開始的，而測序一般要從引物下游幾十個bp以後，訊號才逐漸穩定，能夠讀出來。所以拿pcr引物去測序，那只能測出引物下游幾十個bp以後的片段，這樣你pcr的片段就會測不全。故而需要重新設計測序引物，一般要在所測片段的上游一些。
2樓：賈遠稱婉
測序bai用引物要求非常嚴格，du不同於pcr用引物zhi。pcr用引物一般只要能和模板dao結合，3』端的幾個鹼專基能完
全配對屬，即使引物長達80～100多個鹼基，只要調整pcr反應條件，也能成功進行pcr反應。
而測序用引物便不一樣了，必須嚴格符合以下要求。
（1）長度在15～25個鹼基左右，一般選擇20個鹼基（根據gc含量作適當調整），
（2）3』端盡量選擇g或c鹼基（但不絕對），以增加與模板的結合能力。
（3）tm溫度應選擇50℃～70℃左右。
（4）gc含量應選擇在50%左右，盡量避開a、t、g、c的連續結構。
（5）避開引物自身形成髮夾結構或引物二聚體結構等複雜結構。
（6）保證引物和模板100%匹配，特別是3』端的幾個鹼基一定要100%匹配。同時必須嚴格保證引物和模板之間
只能有乙個結合位點。
3樓：呼新蘭騎丙
看產物濃度，一般迴圈28-35個週期的產物送去測序的時候給個10-15微公升就夠了。引物一般可以用通用引物就不用送，自己的引物需要送，一般也是10微公升足夠了。
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