PCR出不來,引物特異性不高怎麼辦

2021-03-04 04:58:15 字數 902 閱讀 7107

1樓:北京索萊寶科技****

建議:1. 不表達是很可能的,查閱文獻。可以換一種細胞的cdna,也可以重新提一次***的。

2. 引物設計的的時候可以不加酶切位點,與基因的完全匹配,可以適當增加長度(30-40bp)。

3. pcr時可設計乙個正對照,保證pcr的過程沒問題。

4.適當降低一點退火溫度,使用兩輪pcr試試

pcr後電泳是特異性條帶,但測序總是出現結合問題.怎麼辦

2樓:北京索萊寶科技****

第一序列多長?

第二、可以考慮轉殖測序,這樣不容易產生結合。

螢光定量pcr方法的特異性和準確度怎麼計算

3樓:南京金益柏生物科技****

特異性主要看檢測的目的樣品是否是專一的,準確度主要看測量資料之間的偏差

pcr擴增產物的特異性與哪些因素有關

4樓:匿名使用者

pcr產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好於當日電泳檢測,大於48h後帶型不規則甚致消失. 假陰性,不出現擴增條帶 pcr反應的關鍵環節有①模板核酸的製備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及, ④pcr迴圈條件.尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。

pcr非特異性擴增指的是你進行pcr所擴增出來的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯配,導致延伸產物不是目的條帶。非特異性擴增在瓊脂糖電泳時可以看到在目的條帶外出現了其他條帶。

引起非特異性擴增的原因有很多,mg2+濃度過高、退火溫度太低、引物特異性不好等等原因

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首先,引物特異性要好 再,注意操作,避免交叉汙染等

多重種類特異性pcr需要注意什麼

做多重的時候需要你建立單重pcr後再進行多重pcr的條件優化,根據電泳條帶決定加減個因素的用量 用特異性引物擴增不出條帶是因為樣品dna中沒有特異性引物所對應的基因吧。pcr擴增產物的特異性與哪些因素有關 pcr產物的電泳檢測時間 一般為48h以內,有些最好於當日電泳檢測,大於48h後帶型不規則甚致...

果蠅的心臟組織心臟特異性表達pcr可以用全身表達相對比嗎

樓主建議查詢文獻哈,這個是有文獻,建議樓主採納哈 組織特異性的qrt pcr怎麼計算表達量 qrt pcr 是一種應用廣泛的研究基因表達模式的方法,尤其是在樣品量少 螢光定量pcr方法的特異性和準確度怎麼計算 特異性主要看檢測的目的樣品是否是專一的,準確度主要看測量資料之間的偏差 pcr後電泳是特異...

載體蛋白一定要和特異性受體結合嗎

醣蛋白也叫糖被,存在於細胞膜的外表,由細胞膜上的蛋白質與多醣結合形成。受體蛋白專 存在於屬細胞膜上,化學傳遞物質和引起嗅覺 味覺的化學物質以及多種藥物等,通過與細胞膜上的各相應受體蛋白進行特異性結合後,才會起作用。載體蛋白都是跨膜蛋白,是生物膜中運載離子或分子穿膜的蛋白質。採納一下 載體蛋白和受體蛋...