1樓:南京金益柏生物科技****
一般都是用針對mirna的試劑盒,普通的逆轉錄方法我這裡也做過,但是結果不是很穩定,你懂得!
逆轉錄試劑盒適合rt-pcr,也適合pcr嗎
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具體檢視逆轉錄試劑盒說明書,上面一般會有具體詳細的解析。
逆轉錄,螢光定量試劑盒,裡面的試劑應該怎麼
3樓:南京金益柏生物科技****
逆轉錄要-20°儲存,螢光定量有的可以4°儲存就可以不分裝,如果要-20°儲存的話就最好分裝了,說明書上都寫著呢,好好看看說明書!
pcr試劑盒4℃存放可以使用麼
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pcr試劑盒的限制因素主要是引物,但是引物在pcr過程中,特別是檢測性的pcr中,引物的濃度可以比較低的。也就是說,如果你覺得試劑盒太貴,想多用幾次,可以這麼做,用你們平常的pcr體系,加上試劑盒的體系,混雜起來做pcr,譬如你平常都是做25μl的反應,你可以取5μl試劑盒中的體系加上你們自己的pcr體系20μl來做,這樣相當於試劑盒多使用了5倍,結果絕對沒影響。
主要有: 1.磁珠法核酸提取試劑盒2.
磁珠法提取dna試劑盒提取試劑盒(離心柱法)4.磁珠法rna提取試劑盒5.
rna提取試劑盒(離心柱法)6.磁珠法植物基因組dna提取試劑盒7.反轉錄試劑盒8.
膠**試劑盒純化試劑盒10.病毒核酸提取試劑盒。
逆轉錄pcr的實驗步驟用到哪些試劑和儀器
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一、實驗器具與材料:
1、移液器:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl
2、吸頭:1ml、200μl、20μl
3、勻漿管:5ml
4、吸頭臺:放置1ml吸頭的乙個,放置20μl吸頭的乙個。
5、ep管:
6、試劑瓶:2個60ml的棕色試劑瓶(廣口,帶蓋);1個125ml的白色試劑瓶(放無水乙醇)
7、量筒:50ml、250ml、500ml
8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml
9、試管架:5ml、
10、鹽水瓶:250ml、500ml各2個備用,乙個裝無水乙醇,另乙個裝depc水。
11、鋁製飯盒:4個。
12、塑料小飯盒:1個。
13、大瓷缸:2個。
14、錫泊紙:一捲。
15、捲紙:2卷。
16、三角燒瓶:帶蓋,稍大。
二、實驗器具的處理與準備。
1、塑料製品:(包括槍頭、ep管、勻漿管等)
先將depc水從容量瓶中倒入瓷缸中,將塑料製品逐個浸泡其中,其中小槍頭需要吸管打入depc水,過夜,然後高壓,再烤乾備用,實驗前將槍頭等放入吸頭臺,再高壓一次(ep管)
2、玻璃製品:泡酸過夜,沖洗乾淨,蒙錫紙烤乾備用(depc水泡)(洗淨後先泡1‰depc過夜,再烤乾)
3、勻漿器:(包括剪刀、鑷子)先洗淨後,再高壓(不需要泡depc)
三、試劑配製:
1、depc水:吸出1ml放在1000ml雙蒸水中配成1‰depc水,放在1000ml容量瓶中靜置4小時備用。
2、75%乙醇:用無水乙醇 depc水配,然後放-20℃儲存(其中depc水需先高壓)
3、異丙醇:放入棕色瓶中。
4、氯仿:放入棕色瓶中。
5、瓊脂糖。
僅供參考。
6樓:匿名使用者
引物可以使用oligo(dt)18 (50μm)或random hexamers (50ng/μl)。2、模板如使用poly(a)+rna,用量一般在10pg-500ng之間。3、biog rt mix含有優化的dntps和緩衝液,biog rtase mix 含有biog super reverse transcriptase 和rnase inhibitor 4、用於pcr反應的cdna產物體積一般不要超過pcr反應體積的1/10。
real time pcr的試劑盒可以在普通的pcr儀做普通的pcr嗎
7樓:南京金益柏生物科技****
如果是sybr green,需要pcr試劑(最好是master 試劑,含螢光染料的),加上引物和你的樣本就可以了。
如果做taqman,還有探針。
逆轉錄pcr可以研究分子生態學的什麼問題
8樓:南京金益柏生物科技****
主要檢測mrna的表達水平,通過逆轉錄可以得到我們想要的目的基因,為下一步研究做準備。
螢光定量pcr和實時螢光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀?有什麼區別,分別是什麼作用啊?謝謝啊
實時就是指每個階段的螢光都有收集,其實現在所有的螢光定量pcr儀器都是實時的。螢光定量pcr的英文簡寫是 fq pcr,f是螢光的縮寫,q是定量的縮寫。或者寫成是rt pcr。rt就是realtime的縮寫 做定量pcr的目的是為了了解起始模板數的量,這個一下寫不清楚,你看乙個說明書絕對看得懂。而反...
轉錄時DNA和mRNA怎樣合成?
轉錄是dna到mrna的過程,在轉錄過程中,dna模板上的基因被複製成一條mrna鏈,這種複製是通過rna聚合酶的加工完成的,它將dna上的核苷酸序列按照一定的規律轉換為mrna上的核苷酸序列。dna複製和rna轉錄的異同?從模板上來講,複製是利用了dna的雙螺旋結構,以2條dna鏈作為模板鏈分別複...
原核生物DNA複製和轉錄的場所在哪
原核細胞的dna主要存在於擬核內 還包括質粒dna 1.原核細胞中dna複製的場所主要發生於擬核中。2.原核細胞中轉錄的場所主要也是在擬核中。3.擬核是指 環狀dna分子集中的區域稱為擬核。原核生物dna複製,轉錄,翻譯的場所各是 真核生物的dna複製 轉錄場所是細胞核,但翻譯是在細胞質中進行,所以...