293T細胞培養求助,293t是什麼細胞?

2025-03-18 00:00:14 字數 3127 閱讀 6972

1樓:浙衛康

幹細胞培養是幹細胞研究中最為常見、最基本的實驗,對於幹細胞研究者而言,幹細胞培養基的選擇,是乙個對實驗效果影響很大的決定。合適的幹細胞培養體系與細胞種類、培養基成分配比、培養環境有關。

幹細胞培養基產品特點。

完整配方,無需特別新增營養成分。

滲透壓接近人體內環境。

穩定的ph緩衝體系,用細胞反覆篩選的穩定批次血清。

幹細胞培養基產品描述。

人骨髓間充質幹細胞培養基專用於培養人骨髓**的間充質幹細胞的培養。根據人骨髓間充質幹細胞的生長需要,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質、胎牛血清以及其他補給成分。使用本培養基能使間充質幹細胞在理想營養平衡狀態下進行多代擴增而不發生分化。

本培養基ph值可以穩定維持在之間。嚴格無菌,無bingdu和支原體,效能穩定。

產品內容。465ml基礎培養基。

25ml合格的胎牛血清(fbs)

5ml人骨髓間充質幹細胞生長新增劑。

5 ml青黴素/鏈黴素溶液(p/s)

幹細胞培養基產品說明書。

僅供研究使用。不適用於人或動物體外**與診斷。

貯藏條件。間充質幹細胞基礎培養基-4℃儲存,胎牛血清、人骨髓間充質幹細胞生長新增劑/fbs/雙抗-20℃避光儲存。

運輸。冰袋運輸。

使用注意事項。

1、在配製完全培養基前,請把fbs、青黴素-鏈黴素放到冰箱(2-8℃)過夜解凍或直到完全溶解。

2、在使用完全培養基前,需要把培養基放到37℃恆溫水浴中預熱。注意不要超過37℃。

3 、請把配製好的完全培養基放在4℃冰箱避光儲存,並儘量在乙個月內使用完。(培養基中的谷氨醯胺在2-8℃只有1個半月的半衰期)

4、儘量避免培養基的反覆凍融,以使培養基的效果達到良好。

浙衛康醫療科技****(簡稱zwk)成立於2019年,是一家專業從事分子診斷、細胞培養基、細胞培養相關試劑和免疫組化抗體等試劑的研發和生產製造型企業。公司擁有完整的潔淨車間,規模化試劑灌裝、包裝定製、配套加工等生產能力。

細胞培養基是生物製藥領域不可缺少的基石,同時也是科學研究具有決定性的一環。只要是需要用到細胞生產的生物製劑產品,細胞培養基就無可替代。例如,疫苗生產用培養基;抗體、重組蛋白生產用培養基;細胞及基因**用培養基;細胞工程藥物生產用培養基….

以及科學研究領域的藥物研發、新藥篩選、單轉殖抗體製備;藥物作用機理、疾病發生機理研究等。

293t是什麼細胞?

2樓:教育自在人心

腎上皮細胞。

293細胞。

是轉染腺病毒。

e1a基因的人腎上皮細胞系,293t細胞由293細胞派生,同時表達sv40大t抗原,含有sv40複製起始點與啟動子。

區的質粒可以複製。用ca3(po4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染後2-3天用鹼性磷酸酶。

分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293t細胞是過表達蛋白並獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

如何養293、293t系列的細胞?

3樓:陌路情感諮詢

將細胞培養瓶豎立放置,吸走培養基,如果培養基中的脫落細胞較多,說明細胞現在很容易脫落,只要加入1ml的pbs+edta(,來回輕微晃動培養瓶直到細胞完全脫落,加入10mlmem,混勻,不能吹打,分裝2瓶。

如果細胞沒長滿就脫落,則只需加入5mlmem,不分裝。如果培養瓶中的細胞貼壁較牢固,培養基上清沒有細胞脫落碎片,且細胞長滿達到80%以上,吸走培養基,加入5ml的pbs+edta(,迅速輕微晃動,豎立培養瓶,吸走,加入胰酶,37度消化不超過3min。

4樓:網友

1. 養293細胞和293t一樣。以293t為例,預先準備3個t150瓶的293t細胞,培養基為dmem + 10% fbs,1% glutamax ,1% 青黴素-鏈黴素。

2. 將細胞分到12分到12個t150瓶中,每瓶的細胞密度是8×106個。

3. 第二天,鏡下檢查細胞。細胞融合度應大致為30-40%,分佈均勻。

4. 轉染前1小時,取出細胞板,去除原有細胞培養基,加入20ml的opti-mem培養基,將細胞送回培養箱。

5. 取兩支無菌的50ml離心管,其中一支中加入252 μg pnl-egfp/cmv/wpredu3 載體質粒,168 μg pcd/nl-bh*ddd

包裝質粒和84 μg pltr-g質粒,用opti-mem培養基補齊到18ml。另一支中加入500 µl trans-ez溶液和 ml

opti-mem培養基,用電動移液器輕輕混勻。將trans-ez稀釋液滴加到質粒管中,邊加邊輕輕晃勻。

關鍵步驟:推薦使用qiagen質粒大抽試劑盒或相當的試劑盒所製備的質粒。

6. 室溫孵育20分鐘,使dna和trans-ez充分結合形成轉染複合體。

7. 取1支5ml的移液管,將得到的dna-trans-ez複合體均勻滴加入到細胞培養板中,每板3ml。來回晃動培養板,混勻後放回到5%二氧化碳培養箱。

每一皿細胞培養盤不要超過6盤。

8. 6小時後,移去細胞上清,更換為17ml的dmem完全培養基。

9. 轉染後一天觀察細胞,所有的細胞應當都是健康的並且密度接近60-80%。如果所轉染質粒帶有gfp螢光,那麼這時候可以看到大於95%的細胞都是帶有螢光的。

10. 將細胞送回培養箱繼續培養2天(36-48小時)。在這個過程中,細胞會逐漸融合形成多核體,大多數的細胞依然貼壁。

11. 收集所有的上清,分裝到50ml離心管中。

12 4℃,500g離心10分鐘,除去脫落的細胞和大的細胞碎片。

13 總的上清約為204 ml,用250-ml μm pvdf過濾裝置過濾。如果發現濾膜被堵住,表現為過濾速度變慢,更換新的濾器。

293t是什麼細胞

5樓:國民逗爺

293t是淋巴細胞,293t細胞由293細胞通過基因技術派生出的細胞系,是經過腺病毒。

e1a基因的轉染,能表達sv40大t抗原,含有sv40複製起始點與啟動子區。

淋巴細胞是白細胞。

的一種,是體積最小的白細胞。其由淋巴器官產生,主要存在於淋巴管中迴圈的淋巴液中,是機體免疫應答功能的重要細胞成分,是淋巴系統。

幾乎全部免疫功能的主要執行者,是對抗外界感染和監控體內細胞變異的一線「士兵」。

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