1樓：帳號已登出
先單獨加入naoh溶液是為了營造乙個鹼性環境，在鹼性環境下雙縮脲試劑。
b中的cu2+與蛋白質肽鍵。
絡合產生顏色反應。
如果先將雙縮脲試劑a與雙縮脲試劑b混合，即naoh與cuso4溶液混在一起，那麼就會產生cu(oh)2沉澱，藥劑就會失去作用，看不到效果，也就無法判斷是否存在蛋白質。
雙縮脲試劑b的成分是硫酸銅的質量分數。
為 g/ml的水溶液。先將雙縮脲試劑a加入組織樣液，搖盪均勻（必須營造鹼性環境），再加入雙縮脲試劑b，搖盪均勻。
如果組織里含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。
顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
2樓：匿名使用者
因為它要和你們的化學物質發生反應使其失效！
3樓：匿名使用者
先加naoh的話會對蛋白質造成傷害，
雙縮脲試劑的使用為什麼一定要先加a液再加b液
4樓：mono教育
因為a液和b液如果同時加一起，它們之間也會有反應發生，影響實驗的效果，所以分開加好。
先加a液是為了提供鹼性環境，而蛋白質中含有醛基，與新制的氫氧化銅會發生氧化還原反應，生成的過氧化銅只能存在於鹼性環境下，又因為過氧化銅為磚紅色沉澱，與藍色的銅離子在一起才會出現紫色。
5樓：興弘懿那葛
雙縮脲試劑的原理是雙縮脲能夠在鹼性條件下和銅離子形成配合物形成紫色物質，在使用雙縮脲試劑時候，必須注意先加。
g/ml氫氧化鈉溶液形成鹼性環境，再加。
g/ml硫酸銅的水溶液。(若先加入硫酸銅[cuso4]溶液，再加入氫氧化鈉[naoh]溶液，則無法充分製造鹼性環境，此時cuso4會與naoh發生複分解反應，生成藍色氫氧化銅[cu(oh)2]沉澱，導致現象不清，無法較好地達到實驗目的。)。
另外b液加2滴是因為過量會影響配位，影響實驗現象。
為什麼要在雙縮脲試劑中加入酒石酸鉀鈉和碘化鉀?
6樓：養生達人花花
硫酸銅、酒石酸鉀鈉的鹼性溶液中生成紫紅色絡合物，在這種比例的鹼性水溶液中，本來形成的cu(oh)2會與溶液中多餘的oh-形成[cu(oh)4]2- 絡離子，酒石酸鉀鈉的作用就是保護這種絡離子不被析出變為沉澱，從而使試劑失效。
向試劑中加入碘化鉀，可延長試劑的使用壽命。
雙縮脲法 雙縮脲反應產生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關，故可用來測定蛋白質含量。
雙縮脲試劑是乙個用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是乙個鹼性的含銅試液，呈藍色，由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。當底物中含有肽鍵時（多肽）,試液中的銅與多肽配位，配合物呈紫色。
可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm.鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml.
雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅，而氫氧化鉀僅僅是為了提供鹼性環境，因此它可被其他鹼，如氫氧化鈉所代替。
雙縮脲反應的配製雙縮脲試劑的注意事項
7樓：九方欣躍
雙縮脲試劑由naoh溶液（和cuso4溶液（配製而成，配製比例為5：1。但是雙縮脲試劑不用現配現用，先加入naoh營造鹼性環境，再加入cuso4。這是與斐林試劑不同的地方。
雙縮脲試劑要現配現用嗎?
8樓：網友
怎麼說呢，斐林試劑叫做現配現用，cu(oh)2本來就是藍色沉澱，在空氣中放久後不穩定會分解，生成氧化銅，使得有效成份不斷減少，因此要現配現用。而雙縮脲試劑是在樣液中先加氫氧化鈉溶液再加硫酸銅溶液的，目的是為了提供鹼性環境。
9樓：鳳艾完顏聽露
要。雙縮脲試劑使用時，先加入新制的naoh溶液（2ml），振盪搖勻，造成鹼性的反應環境，然後再加入新制的cuso4溶液，振盪搖勻後觀察現象。
雙縮脲試劑 怎麼配？
10樓：乾萊資訊諮詢
鹼性條件下，雙縮脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu離子作用生成紫色沉澱。
靈敏度差，測定範圍窄，樣品需要量大，不同的蛋白質產生顏色的深淺相近，因此它常用於臘慧宴需要快速，但並不需要十分精確的蛋白質測定。 干擾測定的物質包括有：在性質上是氨基酸或肽的緩衝液，如tris緩衝液，因為它們產生陽性呈輪銀色反應，銅離子也容易被還原，有時出現紅色沉澱。
配製：
雙縮脲試劑a是質量分數為 g/ml的naoh水溶液；雙縮脲試劑b是質量分數為 g/ml的cuso4水溶液。
先在待測液中加入雙縮脲試劑a 3ml，振盪均勻（營造鹼性環境），再加入1～2滴雙縮脲試劑b，振盪均勻。如果待測液裡含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。
具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可碧兄與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
以上內容參考：百科-雙縮脲試劑。
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