1樓:愛是地獄
pcr是擴增數目的。
目的基因有700多,擴增產物長度只有200. 這個就是引物選擇的問題了。引物決定了擴增的起始位置,如果你選擇的引物正好是500以後的位置,那麼擴增產物長度就只有200了。
2樓:匿名使用者
擴增產物長度是指你兩個引物對應位點之間的長度。如果這個長度是700,你的擴增產物只有200,那就是非特異性擴增產物,不是你要的目的基因。
3樓:匿名使用者
很可能是引物特異性的問題,一方面查查引物的屬性,一方面公升高溫度(可以提高引物特異性)試試
為什麼pcr擴增出來的大部分都是目的基因
4樓:思朗
直接從生物組織中提取的dna的量一般都是很少的,所以需要pcr進行擴增,使其達到一定的濃度,才方便進行下一步的操作。
什麼是pcr擴增目的基因?
5樓:中國農業出版社
pcr擴增技術已廣泛地用於分離目的基因。如果知道目的基因的全序列或其兩側的序列,可以通過合成一對與模板dna互補的引物,十分有效地擴增出含目的基因的dn**段,採用常規pcr技術擴增分離目的基因比較方便,但必須知道待擴增目的基因dn**段的核苷酸序列,或者至少要求dn**段兩端長約20bp的序列是已知的,這樣才能設計pcr引物進行有效做pcr擴增反應。
此外,利用常規pcr反應,允許擴增的dn**段長度一般在1kb以內,超過1kb時擴增效果顯著下降。對於擴增未知核苷酸序列的目的基因,或是那些長達幾千鹼基對的大基因,則需要選擇特殊型別的pcr策略,目前已採用的有套式pcr、反向pcr、不對稱pcr、錨定pcr、長程pcr、反轉錄pcr、鍋柄pcr和alupcr等。
pcr為什麼要擴增,pcr的目的是獲得目的基因片段?但為什麼要擴增很多次呢,小菜題不懂。。。
6樓:丫頭乖吖
pcr可以在短時間內獲得大量目的基因,節省時間,可以提高實驗效率
7樓:雨天裡的湖畔
大量獲得所需基因片段
轉化後的重組子進行pcr,擴增出來的是目的基因還是整個質粒?為什麼dna測序是在轉化後才進行?
8樓:匿名使用者
是目的基因 這樣才能說明你轉化進去的是連了目的基因的質粒而不是自連的質粒。轉化後挑菌搖菌後提了質粒才能測序,濃度才夠
9樓:李_小_貓
我覺得你應該先搞清楚轉化的目的是什麼。
為什麼「利用pcr技術擴增目的基因」是獲取目的基因的步驟?(
10樓:匿名使用者
直接從生物組織中提取的dna的量一般都是很少的,所以需要pcr進行擴增,使其達到一定的濃度,才方便進行下一步的操作。
11樓:匿名使用者
題目就是原因,pcr是聚合酶鏈式反應,就是擴增目的基因的一種手段
12樓:匿名使用者
你不pcr怎麼把基因給釣出來呢
大家好,問乙個不能等到臺面上的問題:目的基因片段是擴增片段嗎?什麼是rt-pcr的目的基因片段,謝謝
13樓:匿名使用者
沒有必要糾結於這些概念
目的基因,就是你要研究的那個基因。
除非你要轉殖基因全長,不然rt-pcr就是用來擴增一小段(所謂目的基因片段)
14樓:小蠻
第乙個問題是一般
bai是這du樣的
第二個問題是:rt-pcr就是把zhi你的rna提出來,dao反轉錄成cdna,然後把你的目的內基因(當然容是只有外顯子的,通常設計上下游引物會是兩個外顯子上設計的,也就是你的基因的部分cdn**段,一般不會太長,100多到400多bp吧)。通過擴增出來的量,來說明你的基因在這個樣品中的表達量怎麼樣~~~
15樓:船篷下
目的基因不是擴增片段,是用於進行擴增的片段,rt-pcr的目的基因片段實際上是一段具有價值的功能基因,是進行擴增前必須得到的基因。
pcr基因擴增,等長的目的基因是怎麼得到的?以圖示方式表達 5
16樓:匿名使用者
pcr技術抄是dna擴增技術,它能在襲比較短的時間內產生大量的dna。在獲取目的基因後才使用pcr技術。
獲得目的基因的方法:
一、構建基因文庫
提取總dna。
用限制性內切酶將總dna切成小片段,連到質粒或噬菌體載體上,把這些質粒轉化到細菌,隨著細菌繁殖而複製,這個過程又稱為基因轉殖(gene clone)
將總dna包含的基因組各片段分別轉殖在質粒或噬菌體載體上,便構成了該生物的基因文庫(gene library)。
二、反轉錄人工合成互補dna
細胞核中轉錄的mrna,已經加工去除內含子,只有外顯子(編碼蛋白質的序列),比構建基因文庫優越,因此,先從細胞中提取所需的mrna。
以mrna為模板,在逆轉錄酶的作用下,合成互補的dn**段(***plementary dna, cdna),在逆轉錄完成時, mrna被降解。在大腸桿菌dna聚合酶i的klenow片段的作用下,再以第一條dna為模板,合成另一條互補dna鏈。
優點 在細胞分化各階段細胞往往轉錄出特異的編碼特殊蛋白質的mrna。因此,用cdna方法獲取的dn**段往往是具有特定功能的目的基因。
17樓:匿名使用者
想回答的詳細,不過你問的太簡單,我都沒看明白。。。
生物疑問 利用pcr技術擴增含目的基因的dna分子來形成目的基因,需要3步.為什麼?過程是什麼?
18樓:德基廣場
pcr技術copy過程簡介
1.將目的基因與引物,以及耐高溫的dna聚合酶加入pcr擴增儀中。加熱到90~95℃。讓目的基因解旋。
2.降溫至55~60℃,讓引物與①中的dna單鏈接合。
3.加熱至70~75℃,讓耐高溫的dna聚合酶工作,大量擴增目的基因。
影響PCR擴增平台期的因素有哪些
任何一bai 步的操作都有可能是導致du失敗的原因zhi首先你需要清楚地了 dao解pcr的原理,你的版實驗步驟權,每一步都是在幹什麼。網上雖然有,可能跟你的實際情況略有差別,就不粘過來了。主要希望題主明白解決問題的思路,就是每一步操作都會有問題。除了熟悉實驗步驟和原理,操作流程之外,做實驗過程中也...
螢光定量PCR引物設計的問題
ls說得很對 你可以手動改動幾個鹼基,降低引物裡面的dimer,主要是3 端沒有dimer就好。錯配問題,可以用taqman探針來檢測,但是很貴,實在設計不出來再用。可以多設計幾對,然後做個引物測試,挑選出幾對好的,再做qrt。你是直接用primer5設計的引物嗎?有時候時會遇到你說的問題,你可以在...
簡單的英語問題,超簡單英語問題
be is,am,are 的縮寫一般與人稱代詞結合,如 he is he s,she is she s,i am i m,they we are they re we re.這些縮寫的規律是非常嚴格的。但是,s 與名詞或專用名詞結合,就相當於 的 如 john s brother,the dog s...