1樓:
細胞增殖的檢驗方法:brdu標記法
1、細胞以1.5×105 /ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中(
專內放置一蓋玻片),培屬養1天,用含0.4%fcs培養液同步化3天,使絕大多數細胞處於g0 期。
2、終止細胞培養前,加入brdu(終濃度為30μg/l),37°C,孵育40min。
3、棄培養液,玻片用pbs洗滌3次。
4、甲醇/醋酸固定10min。
5、經固定的玻片空氣乾燥,0.3%h2 o2 -甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6、5%正常兔血清封閉。
7、甲醯胺100°C,5min變性核酸。
8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠brdu單抗(工作濃度1:50),陰性對照加pbs或血清。
9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細胞數,計算標記指數(li)。
brdu檢測細胞增殖的方法
2樓:匿名使用者
細胞增殖的檢驗方法:brdu標記法
1、細胞以1.5×105 /ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中(內放置一蓋玻片),培養1天,用含0.4%fcs培養液同步化3天,使絕大多數細胞處於g0 期。
2、終止細胞培養前,加入brdu(終濃度為30μg/l),37°C,孵育40min。
3、棄培養液,玻片用pbs洗滌3次。
4、甲醇/醋酸固定10min。
5、經固定的玻片空氣乾燥,0.3%h2 o2 -甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6、5%正常兔血清封閉。
7、甲醯胺100°C,5min變性核酸。
8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠brdu單抗(工作濃度1:50),陰性對照加pbs或血清。
9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細胞數,計算標記指數(li)。
brdu染色如何確定細胞的增殖能力
3樓:匿名使用者
細胞增殖週期包括g1、s、g2、m 4個時期,其中s期是dna合成期,細胞內dna進行半保留複製,各種構成dna的原料摻入到dna中。
brdu作為一種胸腺嘧啶核苷的類似物(其化學結構特點是胸腺嘧啶的鹼基嘧啶環上與5位c原子連線的甲基被溴代替),像胸腺嘧啶核苷一樣可摻入到細胞合成的dna中。當細胞處於dna合成期而同時又有brdu存在時, 就會有brdu摻入新合成的dna中,只要細胞不消亡,這種brdu就在胞核的dna中長期存留。摻入到dna的brdu可通過抗brdu單轉殖抗體在組織切片或細胞爬片上顯示。
該方法能對細胞週期進行迅速而穩定的測量, 而且標記brdu的細胞只要不受到紫外線照射,對細胞本身沒有功能損害。
該技術可應用到跟蹤檢測移植細胞的存活、分化和功能狀態。
brdu檢測細胞週期結果如何用flow j分析
4樓:匿名使用者
細胞增值的檢驗方法:brdu標記法1、細胞以1.5*105/ml細胞數接種於直徑35ml培養
皿中,培養一天,用含0.4%fcs培養液同步化三天,使絕大多數細胞處於go期。2、終止細胞培養前,加入brdu,37°C孵育40min。
3、棄培養液,波片用pbs洗滌3次。4、甲醇/醋酸固定10min。5、經固定的波片空氣乾燥,0.
3%h2o2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。6、5%正常兔血清封閉。7、甲醯胺100°C,5min變性核酸。
8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠細胞增值的檢驗方法:brdu標記法1、細胞以1.5*105/ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中,培養一天,用含0.
4%fcs培養液同步化三天,使絕大多數細胞處於go期。2、終止細胞培養前,加入brdu,37°C孵育40min。3、棄培養液,波片用pbs洗滌3次。
4、甲醇/醋酸固定10min。5、經固定的波片空氣乾燥,0.3%h2o2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6、5%正常兔血清封閉。7、甲醯胺100°C,5min變性核酸。8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠brdu單抗,陰性對照加pbs或血清。
9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細,數,計算標記指數。rdu單抗,陰性對照加pbs或血清。9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細,數,計算標記指數。
5樓:匿名使用者
你要先在fsc和ssc散點圖上gate出細胞,然後ssc-w和ssc-hgate出單細胞,然後在用brdu/pi 散點圖開啟才能開的比較清楚的圖。
6樓:匿名使用者
你將來要出生的孩子,可能會同時具有以下四種特點:
(1)龍鳳胎。(2)兒子。(3)天才。(4)健康。
一、現在因為種種原因,要求你放棄其中一項,你劃掉那個?
二、現在要求你在剩餘的三項種劃掉一項,你劃掉哪個?
三、現在要求你在剩餘的兩項種選擇屬於你的一項,你選擇哪乙個?
7樓:手機使用者
可能生活環境和受教育程度不同,所以很多觀念和想法不同,這種事情也不能一邊倒的去看,畢竟很多系列我們也不太清楚!只要讓自己站在更高的位置,看更遠的地方!很多事情也就有了答案!
8樓:匿名使用者
過情人節了沒什麼好說的
9樓:曉韓
壓低不能洗澡,血壓低的人群對於水溫很敏感,水溫過高,就會導致低血壓人群的血管出現擴張,然後會慢慢感覺自己的大腦出現眩暈狀態,有時候甚至突然倒地不起,對於老年人來說,如果這種情況後果是非常大的。2.體質差不能洗澡,對於那些體質本來就比較差的人來說,如果洗個冷水澡,那可真受折磨了,因為體質差的人遇冷容易受到刺激,有時候會出現感冒、發燒等問題,但是,也並不是說體質差的人就不可以碰冷水,日常的冷水洗臉、洗腳還是可以的,但是千萬別洗澡。
10樓:匿名使用者
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11樓:匿名使用者
企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。
為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.
5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。
根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。
企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。
為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。企業所得稅改革是本次減稅法案的核心,也得到美國商界的普遍支援。根據稅改法案,美國聯邦企業所得稅稅率將從現在的35%降至21%;對美國企業留存海外的利潤一次性徵稅,其中現金利潤的稅率為15.
5%;推行「屬地制」徵稅原則,即未來美國企業的海外利潤將只需在利潤產生的國家交稅,而無需向美國**交稅。為鼓勵企業長期投資,企業所得稅稅改內容是永久的。
12樓:匿名使用者
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貼壁細胞用brdu做增殖實驗嗎
13樓:
細胞增殖的檢驗方法:brdu標記法 1、細胞以1.5×105 /ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中(內放置一蓋玻片專),培養1天,用
屬含0.4%fcs培養液同步化3天,使絕大多數細胞處於g0 期。2、終止細胞培養前,加入brdu(終濃度為30μg/l),37°C,孵育40min。
3、棄培養液,玻片用pbs洗滌3次。4、甲醇/醋酸固定10min。5、經固定的玻片空氣乾燥,0.
3%h2 o2 -甲醇30min滅活內源性氧化酶。6、5%正常兔血清封閉。7、甲醯胺100°C,5min變性核酸。
8、冰浴冷卻後pbs洗滌,加1抗即抗小鼠brdu單抗(工作濃度1:50),陰性對照加pbs或血清。9、按abc法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及brdu陽性細胞數,計算標記指數(li)。
c 如何輸入陣列，C 如何輸入陣列
輸入陣列 的 如下內 容 int n 0 printf please enter the number n scanf d n int number new int n for int i 0 i int array 20 for int n 0，n 20，n cin array n 輸入的陣列下標...
c 陣列輸出，C 如何輸出陣列內容
0x 數字代表十六進位制的書 0x00是十六進位制中的0 和0沒區別 char 0x00 有兩種涵義 1 以0x00為初值構建乙個char資料 2強制轉換0x00為char型資料 在這裡這兩種涵義都是呼叫同乙個方法實現的 所以沒區別一次性輸出是不能用字元輸出的，再說字元 0 為空沒有輸出所以必須轉換...
C語言如何定義一維陣列並給陣列賦值
例如 int a 10 列印該陣列 for int i 0 i 0 i printf a i 求陣列中的最大值 int max 0 for int i 0 i個陣列的平均值 int sub 0 for int i 0 i上是純手打 有段時間沒接觸c了 可能關於部分方法使用用點錯 只做借鑑 希望可以幫...