高效液相色譜法流動相配比的改變,高效液相色譜法流動相如何設定比例

2021-03-04 06:25:28 字數 1573 閱讀 4371

1樓:密碼是

不知道你做的是不是中藥成分。甲醇和冰醋酸的話,隨著甲醇比例的提高,保留時間會提前,隨著冰醋酸的比例提高,保留時間會滯後。而分離效果來說隨著保留時間滯後,圖形一般情況下都會出現,峰與峰之間的距離變大的現象,這有利於分離,但是缺點是保留時間變長。

試過改變流動相配比後峰形還是不好的話,建議你改變冰醋酸的含量。

2樓:微笑炒麵

極性流動相的增加會使出峰時間提早,分離效果的話要看你分離的是什麼啦,兩峰之間的時間也會縮短的,要是太靠近的話,分離效果肯定是不好的

高效液相色譜法流動相如何設定比例

3樓:匿名使用者

1、流動相對樣品具有一定

的溶解能力,保證樣品組分不會沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。

2、流動相與樣品不產生化學反應。

3、流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長幫浦的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

4、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用uv檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配製。

5、流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:

(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。

(2)流動相與樣品不產生化學反應

(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長幫浦的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

(4)流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用uv檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配製。

(5)流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。

(6)在流動相配製好後,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利於檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用

4樓:匿名使用者

與樣品有關係啊,就是讓流動相讓樣品有乙個合適的分離度

5樓:匿名使用者

流動相的比例與柱子的效能、你所需要的保留時間以及樣品的區分度有關係,這個要是具體情況而定。

高效液相色譜分離度不好該怎樣處理?

6樓:匿名使用者

1、減少有機相比例(反相色譜,正相色譜增大有機相比例),流速不會影響分離度

2、更換色譜柱

3、關掉柱溫箱,增大柱溫只能減小分離度

4,減小進樣量

7樓:鵂鶹

1、流動相選擇配比調整一下。

2、如果有柱溫箱的話,用柱溫箱加熱試試。

3、以前分離的好不好,如果好現在不好,色譜柱問題比較大,換根色譜柱!

8樓:匿名使用者

最好看看買的hplc是否效能可靠。

9樓:匿名使用者

1.調整流動相的比例或者成分

2.適當的降低流速或者降低柱溫

3.換跟廠家的柱子試試,不同廠家的柱子效能差很多的

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