高效液相色譜峰分離度是前鋒還是後峰

2021-03-04 05:09:16 字數 2549 閱讀 4427

1樓:硪喂信

主要通過流動相的更改和更換色譜柱來實現。流動相的更改可以通過更換和梯度洗脫兩種辦法實現。具體情況要看你的樣品來確定。

更換色譜柱一般除了找到合適型別的柱子之外還可以用原柱的型號,只是把柱子加長也可能會實現分離完全。

高效液相色譜儀的分離度為什麼要大於1.5

2樓:匿名使用者

相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值.也叫解析度,表示相鄰兩峰的分離程度.r越大,表明相鄰兩組分分離越好.

1、一般說當r<1時,兩峰有部分重疊;當r=1.0時,分離度可達98%

2、當r=1.5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%.

r≥1.5稱為完全分離.《中國藥典》規定r應大於1.

5.通常用r=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標誌.

3、當r=1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內側峰基重疊約2%

分離度計算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

所以當兩峰分離程度達99.7%時,分享儀式至少應=1.5.

3樓:匿名使用者

分離度達到1.5可以認為兩個成分完全分離,不會互相干擾

高效液相色譜如何計算分離度

4樓:溯風

不是很明白樓主的意思,你的意思是進了5針嗎?每個都給出保留時間還是一張圖上有5個峰呢?

分離度是計算臨近2峰的,單個峰是沒有辦法說分沒分開的問題的。

如果是5張圖上的話,每張圖都要算對照和臨近峰之間的分離度,而且盡量重複性高。要是是一張圖上的5個峰的話就要算對照品臨近兩峰之間的分離度了。

一般的液相色譜工作站都會自動給出,你可以向以前做過的人諮詢一下應該怎麼設定。

分離度又稱解析度,為了判斷分離物質對色譜柱在色譜柱中的分離情況,常用分離度作為柱的總分離效能指標.用r表示.r等於相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比.

  resolution,r   相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫解析度,表示相鄰兩峰的分離程度。r越大,表明相鄰兩組分分離越好。

一般說當r<1時,兩峰有部分重疊;當r=1.0時,分離度可達98%;當r=1.5時,分離度可達99.

7%。通常用r=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標誌。

當r=1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內側峰基重疊約2%。r=1.

5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%。r≥1.

5稱為完全分離。《中國藥典》規定r應大於1.5。

  分離度計算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

5樓:匿名使用者

分離度是對於兩個相臨峰來說的,分離度r=保留時間的差值/半峰寬之和,只要保證相鄰峰分離度r>1.5就行,一般要求2最好。不相鄰的峰之間的分離度就毫無意義了,引起分離度r必然》1.

5。其實一般的工作站都能給出分離度的。可以自己試試看。

6樓:匿名使用者

你用的什麼軟體,軟體上有個k'的就是分離度,一般不自己計算,你把那個新增上,軟體有計算。

高效液相色譜圖中的兩個峰沒有完全分開是什麼原因造成的呀?

7樓:匿名使用者

通常情況下 首先會考慮調整流動相的比例 您如果用的反相色譜 應減少有機相,具體如何調整應參考3的原理,就是有機相減少,保留時間變長,如果原來是30%的有機相,現在減為20%,目標峰的保留時間會延長為原來的三倍;也有可能是柱子完了,峰分叉

8樓:匿名使用者

原因主要有幾種:

1 流動相不合適,更換流動相及重新摸配比。

2 可以通過調整流速達到更好的分離結果,如原來的1 ml/min,調到0.7ml/min,可能會有意想不到的效果。

3 還有一種可能是化合物部分氧化,用流動相按1:1稀釋之後,再跑一次,可能分叉就沒有了。

4 柱子可能有問題了,這個可以用標準品驗證一下。

經驗之談,歡迎交流。

9樓:匿名使用者

色譜柱不適合,或者流動相比例不好。改變流動相比例或更換流動相。某些情況下可以加入有機酸改變ph

液相色譜中ph大小會影響色譜峰的分離度嗎

10樓:匿名使用者

通常情況下

ph對液相色譜色譜分離的影響主要決定於待分離的組分對ph的敏感度,換句話說就是待分離的組分極性的大小,當待分離的組分極性較大,比如有機弱酸或有機弱鹼等,ph不同會影響有機酸鹼的存在型體,當大量離子型組分存在時,會改變待分離組分的分配係數,從而改變分離度。

極端情況下

ph過高或過低會導致矽膠表面性質,所以現在的液相色譜柱有使用的ph範圍,當ph不合適的情況下,會導致色譜柱的損壞,進而導致分離情況發生變化。

所以如果ph不超過色譜柱的容忍範圍,ph的影響主要決定於待分離組分的極性大小。

11樓:仝靚田華皓

是指緩衝液的ph。加了有機相對ph影響不大,在柱子的耐受範圍內就行,樓主不必擔心。但是下次不要再做錯了。

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高效液相色譜儀的分離度為什麼要大於

相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值.也叫解析度,表示相鄰兩峰的分離程度.r越大,表明相鄰兩組分分離越好.1 一般說當r 1時,兩峰有部分重疊 當r 1.0時,分離度可達98 2 當r 1.5時,稱為6 分離,裸露峰面積為99.7 r 1.5稱為完全分離.中國藥典 規定r應大於1.5.通常用r 1...