1樓：南京金益柏生物科技****
原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應.由於抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的乙個因素,就可以查出另乙個因素.免疫螢光技術就是將不影響抗原抗體活性的螢光色素標記在抗體（或抗原）上,與其相應的抗原（或抗體）結合後,在螢光顯微鏡下呈現一種特異性螢光反應.
直接法：將標記的特異性螢光抗體,直接加在抗原標本上,經一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應的多餘螢光抗體,室溫下乾燥後封片、鏡檢.
間接法：如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體（第一抗體）與抗原標本進行反應,用水洗去未反應的抗體,再用標記的抗抗體（第二抗體）與抗原標本反應,使之形成抗原—抗體—抗體複合物,再用水洗去未反應的標記抗體,乾燥、封片後鏡檢.如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同.
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同於血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發生反應,因此,製備標記抗體適用於雞任何抗原的診斷.
）螢光效率高,標記後下降不明顯.
3）螢光色澤與背景色澤對比鮮明.
4）標記後能保持生物學活性和免疫活性
5）標記方法簡單、快速.6）安全無毒
直接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的異同
2樓：糖豆豆
1、接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的不同：
直接免疫螢光的實驗方案通常較短，因為它只需要乙個標記步驟。間接免疫螢光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。
直接免疫螢光方法的實驗方案步驟較少，更簡單。間接免疫螢光方法中必須選擇適當的二抗，增加了複雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出，每個二抗需要靶向不同的物種並偶聯至不同染料。
直接免疫螢光方法中獲得的訊號與間接方法相比可能較弱，因為直接方法中沒有使用二抗進行訊號放大。免疫螢光多個二抗結合一抗可使訊號放大。
2、直接免疫螢光和間接免疫螢光染色方法的相同之處：
免疫螢光 (if) 或細胞成像技術使用抗體將螢光染料（也稱為螢光素或螢光物）標記到特異性目標抗原上，所用螢光染料有諸如異硫氰酸螢光素 (fitc) 等。而通過化學方法偶聯螢光素的抗體被廣泛使用於if實驗中。
根據螢光素與一抗還是二抗偶聯，我們將 if 方法分為兩類：直接 if-使用單個抗體，該抗體直接指向目的靶標，一抗與螢光素直接偶聯；間接 if-使用兩個抗體，一抗未偶聯，螢光素偶聯的二抗指向一抗，並用於檢測。
間接法測抗體基本原理：
染色程式分為兩步，第一步，用未知未標記的抗體（待檢標本）加到已知抗原標本上，在溼盒中37℃保溫30min，使抗原抗體充分結合，然後洗滌，除去未結合的抗體。
第二步，加上螢光標記的抗球蛋白抗體或抗igg、igm抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應，標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合，從而可鑑定未知抗體。
3樓：天蠍神經俠侶
免疫螢光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體
做免疫螢光的抗體能用來做流式嗎
4樓：南京金益柏生物科技****
免疫螢光是直接染色還是間接法？我覺得你是想用螢光標記的抗ngf/cox-2抗體來做直接染色，這樣的話可以在流式上試試。但是一般免疫螢光是用間接法，這樣的話螢光抗體只anti某個種屬的抗體（視一抗而定），不是anti ngf或cox-2的，這樣就不能用於流式了。
如果乙個抗體可以用來「做western blot，免疫螢光，免疫共沉澱,elisa」，我估計著是hrp或鹼性磷酸酶或生物素之類標記的，然後需要再加螢光標記的二抗，這類抗體也是不能做流式用的。
我只用過流式的抗體來做免疫螢光（直接染色），效果還不錯，但是反過來就沒試過。
樓上兩位還是要仔細看下產品說明書
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