1樓:隆合英赧綢
凱氏定氮。靈敏度低,適用於。
氮,誤差為。
費時。8~10小時銀鬥。
將蛋白氮轉化為氨,用酸吸收後滴定。
非蛋白氮(可用三氯乙酸沉澱蛋白質而分離)
用於標準蛋白質含量的準確測定;干擾少;費時太長。
雙縮脲法(biuret法)
靈敏度低。1~20mg
中速。20~30分鐘。
多肽鍵+鹼性cu2+®紫色絡合物。
硫酸銨;tris緩衝液;某些氨基酸。
用於快速測定,但不太靈敏;不同蛋白質返搏鋒顯色相似。
紫外吸收法。
較為靈敏。50~100mg
快速。5~10分鐘。
蛋白質中的酪氨酸和色氨酸殘基在280nm處的光吸收。
各種嘌吟和嘧啶;
folin-酚試劑法(lowry法)
靈敏度高。5mg
慢速。40~60分鐘。
雙縮脲反應;磷鉬酸-磷鎢酸試劑被tyr和phe還原。
硫酸銨;tris緩衝液;甘氨酸;
各種硫醇。耗費時間長;操作要嚴格計時;顏色深淺漏晌隨不同蛋白質變化。
考馬斯亮藍法(bradford法)
靈敏度最高。
1~5mg快速5~15分鐘。
考馬斯亮藍染料與蛋白質結合時,其lmax由465nm變為595nm強鹼性緩衝液;
sds最好的方法;干擾物質少;顏色穩定;
顏色深淺隨不同蛋白質變化。
靈敏度高的檢測蛋白質方法
2樓:烏半蓮閉珠
原理:苯丙氨酸和酪氨酸含有苯環,苯環與硝酸作用產生黃色物質。而這兩種氨基酸是基本氨基酸,是構成蛋白質的常見氨基酸,所以蛋白質也會有黃色反應。
操作方法:在試管里加少量蛋白質溶液,然後加幾滴濃硝酸溶液,微熱,觀察現象。
實驗現象:有黃色沉澱析出。
注意卜侍事項:濃硝酸濃度不應低於40%
這個方法是作為蛋白質的定性試驗,一般不用它來測定蛋白質含量,原因是不知道乙個蛋白質裡面含有多少苯丙氨酸乎弊型和酪氨酸,靈敏度很高,但是不存在定量範圍這一說。如果要定量,現在通用的是考馬歲猜斯亮藍法(bradford法)。
靈敏度高的檢測蛋白質方法
3樓:朔犬
凱氏定氮 靈敏度低,適用於 氮,誤差為 ±2% 費時。
8~10小時 將蛋白氮轉化為氨,用酸吸收後滴定 非蛋白氮(可用三氯乙酸沉澱蛋白質而分離) 用於標準蛋白質含量的準確測定;干擾少;費時太長。
雙縮脲法(biuret法) 靈敏度低 1~20mg 中速 20~30分鐘 多肽鍵+鹼性cu2+®紫色絡合物 硫酸銨;tris緩衝液;某些氨基酸 用於快速測定,但不太靈敏;不同蛋白質顯色相似。
紫外吸收法 較為靈敏 50~100mg 快速 5~10分鐘 蛋白質中的酪氨酸和色氨酸殘基在280nm處的光吸收 各種嘌吟和嘧啶;
folin-酚試劑法(lowry法) 靈敏度高 ~5mg 慢速 40~60分鐘 雙縮脲反應;磷鉬酸-磷鎢酸試劑被tyr和phe還原 硫酸銨;tris緩衝液;甘氨酸;
各種硫醇 耗費時間長;操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化。
考馬斯亮藍法(bradford法) 靈敏度最高 1~5mg 快速5~15分鐘 考馬斯亮藍染料與蛋白質結合時,其lmax由465nm變為595nm 強鹼性緩衝液;
sds 最好的方法;干擾物質少;顏色穩定; 顏色深淺隨不同蛋白質變化。
4樓:網友
1.如果是考馬斯亮藍染色,試試銀染。
2.試試濃縮,純化之後行不行。
酶是一種蛋白質,酶具有蛋白質的什么特性
雖然酶大多是蛋白質,但少數具有生物催化功能的分子並非為蛋白質,有一些被稱為核酶的rna分子也具有催化功能。是蛋白質的這些酶具有蛋白質的特性,具體如下 1 水解反應,在酸 鹼或酶的作用下發生水解反應,經過多肽,最後得到多種 氨基酸。2 變性,在熱 酸 鹼 重金屬鹽 紫外線等作用下,會發生性質上的改變而...
鵝蛋富含多種蛋白質,孕婦能吃鵝蛋嗎?
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蛋白質含量高的食物有哪些
含蛋白質多的食物包括 牲畜的奶,如牛奶 羊奶 馬奶等 畜肉,如牛 羊 豬 狗肉等 禽肉,如雞 鴨 鵝 鵪鶉 駝鳥等 蛋類,如雞蛋 鴨蛋 鵪鶉 蛋等及魚 蝦 蟹等 還有大豆類,包括黃豆 大青豆和黑豆等,其中以黃豆的營養價值最高,它是嬰幼兒食品中優質的蛋白質 此外像芝麻 瓜子 核桃 杏仁 松子等乾果類的...