1樓：幸運的我是魔鬼
細胞培養防止汙染的操作方法：
1、準備工作：準備工作的內容包括器皿的清洗、乾燥與消毒，培養基。
與其他試劑的配製、分裝及滅菌，無菌室或超淨臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與除錯。
2、取材：在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）後接入培養器皿中，數謹握如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首次培養稱為原代培養。
3、培養：將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養，則直接將組織塊接入培養器皿底部，幾個小時後組織塊可貼牢在底部再加入培養基。
4、凍存及復甦：為了儲存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞碸。
或甘油）的培養基，以一定的冷卻速度凍存，最終儲存於液氮中。
在極低的溫度下，細胞儲存的時間幾乎是無限的。復甦一般採用快融方法，即從晌咐液氮中取出凍存管後，立即放入37℃水中使之薯慶在一分鐘內迅速融解。然後將細胞轉入培養器皿中進行培養。
細胞培養注意事項
1、確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經消毒並檢測沒有問題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。
2、確定衣服的袖口已經卷起或者白大褂的袖口已經紮緊。
3、確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋鬆。
4、儘量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）後在火焰上簡單燒灼。
以上內容參考：百科-細胞培養。
2樓：普諾賽
1.實驗孫肢進行前，超淨臺用紫外燈照射30-60min，然後用75%酒精擦拭超淨臺臺面，並開啟超淨颱風機運轉5-10min再開始閉粗實驗操作。
2.實驗用品用75%酒精擦拭後才能放入超淨臺內；實驗用品用完應移出超淨臺，以利於空氣的流通；實驗完成後用75%酒精擦拭超淨臺則態世臺面。
3.每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養基也不要共享同一瓶培養基，避免細胞間的交叉汙染。
4.操作時小心取用無菌的物品，避免汙染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸後應立即更換；不要在開啟的容器瓶口正上方操作，容器開啟後，傾斜45°操作，操作完成後及時蓋上瓶蓋。
培養箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，最後紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每週更換），待培養箱內溫度、溼度、co2濃度穩定後再放入細胞。
6.定期清洗或更換超淨臺過濾膜、預濾網。
如何防止細胞培養出現汙染
3樓：薇薇vv小童鞋
防止細胞培養出現汙染的方法如下：
1、從培養箱取放細胞前，用酒精清潔雙手（或手套），儘量縮短開門時間和減少開門次數。培養瓶放入培養箱前，用酒精消毒表面，並稍等至酒精揮發後再放入，以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。
2、操作的時候防護服、口罩、手套缺一不可。操作前，準備好所有實驗所需物品，以減少走動，物品需有序擺放在超淨臺觸手可及的地方，同時空留足夠操作空間。
3、操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子，移至操作區外圍，儘量不要從開口容器上經過。
4、使用移液槍時，將容器傾斜以便於移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發生倒吸情況，要及時用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導致細菌滋生。
5、凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復甦細胞時，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認蓋子是否擰緊。
在細胞培養的過程中避免汙染的關鍵環節有哪些
4樓：帳號已登出
1、實驗人員的操作。
2、細胞培養體系。
3、細胞培養環境。
4、細胞**也會有所影響。
為了減少汙染對細胞培養的影響，必須建立細胞凍存庫。細胞凍存庫應該分主細胞庫和工作細胞庫，當需要做實驗時從主細胞庫中復甦細胞建立工作細胞庫。每乙個凍存標本都應明確記錄細胞的性質、代數及有無汙染。
同時還應建立規範的檢測程式進行菌檢及細胞鑑定。
5樓：若淵
第一點就是所用儀器都要乾淨，第二點就是儘量不要讓細胞接觸「空氣」
細胞培養，請問是什麼汙染？
6樓：阿凱通訊數碼生活助手
您好，細胞培養物汙染往往是細胞培養實驗室最常遇到的問題，有時會帶來十分嚴重的後果。細胞培養汙染物主要分為兩類，一類是化學汙染物，例如：培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和去汙劑，另一類是生物汙染物，例如：
細菌、黴菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉汙染。儘管無法徹底消除汙染，
7樓：今天不上火
細胞培養過程中的汙染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。
培養細胞受細菌汙染後，會出現培養液變混濁，ph改變。也有的培養液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發現菌體才知汙染。所以，每天應仔細觀察。
汙染後細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗，最後變圓脫落死亡，造成試驗失敗和細胞株(系)丟失。
8樓：琦韋
可能是物理性汙染，物理型汙染通過影響細胞培養體系中的生化成本，從而影響細胞的代謝，比如溫度，放射線，震動，輻射會對細胞產生影響。
9樓：情感蜜蜂
這個是有多種情況的，有可能是細菌，細菌需要在顯微鏡下顯示，也可能是黴菌汙染或者是支原體感染或者是黑膠蟲，也可能是真菌感染。或者是原蟲感染。
10樓：名字好丶難起
請先確定一下你的細胞狀態如何，細胞狀態未受影響的話，我覺得那一團一團的可能是所加胎牛血清裡的一些成分，血清裡會有一些沉澱，在使用之前搖勻一下。如果細胞狀態受影響了，那可能是細菌或真菌汙染，需要重新復甦一支新的細胞。
11樓：情感解惑公尺洛
應該是受到了一定的汙染，是不是放置的環境溼度不好。可以嘗試換乙個環境或者是換液的時候，注意一下具體的流程。
好好檢檢視一下是哪個環節出現了問題。有可能是受到了二次的汙染。
如何避免細胞培養過程中微生物的汙染
12樓：網友
相比微生物而言，細胞的生長極其緩慢，因此在培養過程中容易被微生物汙染。
減少汙染的方法。
1、潔淨的環境；因為空氣和人體有大量的微生物，因此要注意對環境的消毒，如紫外線滅菌，酒精擦拭表面和操作者的手，苯酚噴灑三角瓶等容器的表面，超淨工作臺注意定期更換濾膜。
2、嚴格的操作規範。多數汙染都是因為操作者無菌操作技術不過關而造成的，因此嚴格按照無菌操作要求進行。
3、清潔的培養環境。多數對培養的環境不大注重，培養環境做到乾淨，無垃圾等廢棄有機物堆積，定期消毒即可。
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