1樓：匿名使用者
高效液相色芹者譜儀操作步驟：
1)． 過濾流動相，根據需要選擇不同的濾膜。
2)． 對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3)． 開啟hplc工作站（包括計算機軟體和色譜儀），連線好流動相管道，連線檢測系統。
4)． 進入hplc控制介面主選單，點選manual，進入手動選單。
5)． 有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗幫浦和進樣閥。沖洗幫浦，直接在幫浦的出水口，用嫌納薯針頭抽取。沖洗進樣閥，需要在manual選單下，先點選purge，再點選start，沖洗時速度不要超過10 ml/min。
6)． 調節流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點選injure，選用合適茄老的流速，點選on，走基線，觀察基線的情況。
7)． 設計走樣方法。點選file，選取select users and methods，可以選取現有的各種走樣方法。若需建立乙個新的方法，點選new method。
選取需要的配件，包括進樣閥，幫浦，檢測器等，根據需要而不同。選完後，點選protocol。乙個完整的走樣方法需要包括：
a.進樣前的穩流，一般2-5分鐘；b.基線歸零；c.
進樣閥的loading-inject轉換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。
8)． 進樣和進樣後操作。選定走樣方法，點選start。進樣，所有的樣品均需過濾。
方法走完後，點選postrun，可記錄資料和做標記等。全部樣品走完後，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩餘物。
9)． 關機時，先關計算機，再關液相色譜。
10)． 填寫登記本，由負責人簽字。
高效液相色譜含量測定中分析方法認證的主要內容
2樓：
含量方法學認證主要考察以下幾個性質：
1.專屬性：檢視被測物質與被測結果間是否正確且唯一對應。
考察方法：將處被測成分外的其他物質均做空白乾擾對照，包括流動相、輔料空白、溶劑空白、其他成分（多組分產品）空白、如果方法有衍生還應包括衍生空白等等。
2.精密度：檢視方法多次測定是否能夠得到相同的結果。
考察方法：重複性試驗，應包括儀器精密度（對照多次進樣檢視偏差），方法精密度（多次測定同一樣品檢視結果，該測定應包含全部試驗過程，即配製多個供試品溶液），中間精密度（不同人員不同時間不同儀器，最好試劑和實驗室也更換，測定同一樣品，檢視結果偏差）。rsd應小於2%
3.準確度：測得結果與實際量間是否一致。
考察方法：通過**率試驗來確定，應包含3個濃度至少9個樣品的測定結果，測定時應採取對照品（或原料）加輔料等其他干擾，計算**率和結果偏差。視方法而定一般**率應在95~105%，rsd小於2%
5.定量限：當物質達到定量限濃度以上時，該方法可以對該物質進行定量檢測。
考察方法：當被測物峰高：訊號噪音=10:1時，當前濃度即為定量限。如果想做更加可靠的實驗，應在定量限處考察精密度和**率。
6.耐用性：方法對實驗環境的耐受程度。即當實驗條件發生細微變化時，方法仍然能夠保持測定的準確。
考察方法：通過幾項實驗來確定：溶液穩定性（相同溶液在幾小時內多次進樣檢視結果），色譜條件變化（應包括柱溫、流速、色譜柱批次、檢測波長等條件的輕微變化）。
高效液相色譜法（high performance liquid chromatography \ hplc）又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。高效液相色譜是色譜法的乙個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用 。
3樓：烏盟人在海南
精密度，準確度，專屬性，耐用性等指標。
高效液相色譜外標法測含量
4樓：網友
請說明你用的是什麼型號的儀器，什麼樣的工作站？
如果你的工作站比較先進，只需要把特定的值輸進去。後面的事你就呼叫你要計算的樣品就行了，它會以自動計算，給你出報告結果。
5樓：網友
測量對照品溶液和供試品溶液中待測成分的峰面積或峰高計算：含量等於對照品的峰面積/待測物質的峰面積*標準品的濃度。
6樓：譜寫娜一天
不同廠家裝置是不同的，比如安捷倫1100（以前的老型號了，新型號沒用過不知道是否更新）就是需要根據峰面積手動計算的，沃特斯2695好像是會自動計算含量的。計算結果是要和標準曲線一塊兒出具才完整的。
高效液相色譜有幾種定量方法？其中那種是比較精確的定量方法？並簡述？
7樓：覀覀覀瓜瓜瓜
峰面積法、峰高法、歸一法、外標法。峰面積法是比較精確的定量方法。
簡介：高效液相色譜法（highperformanceliquidchromatography\hplc）又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。它是在生化和分析化學中常用的柱層析儀。
高效液相色譜是色譜法的乙個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法有效方便快捷地解決化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中得出想要的資料，成為重要的分離分析技術。
用高效液相色譜法怎麼算的樣品濃度
8樓：網友
含量=[（濃度x稀釋倍數）/供試品稱樣量]x100%首先確定樣品成分，獲取該成分的純品（對照品），將對照品溶液配製成與樣品成分濃度相當的濃度（比如樣品濃度是10mg/ml左右，對照品溶液就配製成10mg/ml）。
對照品溶液和供試品溶液分別進樣，進行色譜分析，獲得對照品成分峰面積與供試品溶液峰面積。
此時已知對照溶液峰面積，對照溶液濃度，求供試品溶液濃度，因為成分在液相中響應值不變，故對照品溶液濃度/對照品溶液峰面積=f（即響應因子）=供試品溶液濃度/供試品溶液峰面積，求得供試品溶液濃度。
高效液相色譜法的計算公式
9樓：重慶輝煌機車
高效液相色譜即hplc 在網上有專門的資料處理教程， 幫您找了這個，21頁開始講的是具體公式， 不過前面的引數選擇應該對您也有許多幫助。
高效液相色譜法怎麼測分子量
10樓：網友
高效液相色譜法想要測試分子量就得lc-ms。單lc只能測試純度和含量。
11樓：網友
目前，只用hplc測分子量基本不可能。
採用gpc（凝膠滲透色譜）柱，以醋酸鹽緩衝溶液，(0. 2m ph 值4. 0) 為流動相，示差折光檢測器檢測。也只能測乙個大概的分子量。
測分子量主要還是用質譜。
12樓：色譜世界
高效液相色譜法測分子量一般是採用凝膠色譜法。方法原理和操作這裡說不清楚，你可以到「色譜世界」**的學習培訓欄目看看，有詳細介紹。
13樓：明朝的神機
高效液相色譜法測分子量一般是採用凝膠色譜法。
14樓：網友
這個需要一根適合的分子量範圍的色譜柱 或者多根串聯 需要窄分部的標準品至少 4個分子量。之後才能作三介的曲線去校正。gpc的分部誤差能在20%就差不多了。
高效液相色譜法測定中藥含量採用的方法有哪些?
15樓：網友
主要是外標法紫外檢測器測定。
高效液相色譜法流動相配比的改變,高效液相色譜法流動相如何設定比例
不知道你做的是不是中藥成分。甲醇和冰醋酸的話，隨著甲醇比例的提高，保留時間會提前，隨著冰醋酸的比例提高，保留時間會滯後。而分離效果來說隨著保留時間滯後，圖形一般情況下都會出現，峰與峰之間的距離變大的現象，這有利於分離，但是缺點是保留時間變長。試過改變流動相配比後峰形還是不好的話，建議你改變冰醋酸的含...
高效液相色譜法分離某物質得到的色譜圖兩個峰值相同，是什麼原因
先看看峰寬，出峰很快的峰寬一定會很窄，反之最有可能的是你的柱子壞了或者回填料不合適。確定柱子答沒問題的話，可能是兩個物質沒分開 峰高相同的兩物質沒分開有點巧合了。可能性不大 可以調整有機相和水相的比例。還是不行的話再嘗試更換水相的鹽種類或者ph 但是一般用到的可能性不大，ph主要是用於解決多組分分離...
如何建立高效液相色譜法測定有關物質的方法
有關物質是研究藥品中除主成分以外的雜質，它可能是原料藥合成過程中帶入的原料 中間體 試劑 降解物 副產物 聚合體 異構體以及不同晶型 旋光異構的物質，也可能是製劑過程中產生的降解物，或是在貯藏 運輸 使用過程中產生的降解物等。這些雜質的存在直接反映藥品的有效性和安全性，故要對其進行研究，特別是在藥品...