rna溶於depc水後如何沉澱下來

2025-02-27 09:20:28 字數 1348 閱讀 8316

1樓:匿名使用者

你頌冊絕的情況可能有兩種可能:1.像二樓說的那樣,在用酒精洗完沉澱後,乾燥過程時間太長,導致rna不好溶解。

但這種情況可像你那樣在水浴中加熱溶解個10min,一般是會溶的。所以你的問題看起來更像是第二種情況:2.

剩下的不溶沉澱根本不是rna,而是在提取過程中沒有去幹淨的雜質或蛋白。這種東西是不會溶的。而且有時不會影響rna的質量,瞬時離心一下把沉澱甩到管底,吸上面的清液就行了;但如果提取過程中rna發生了降解,這時即便是上面的野姿上清液也是不能用的了姿槐。

你可以先用上面的上清液跑個膠看看完整性如何。如果兩條或三條帶就不妨礙使用。祝順利!

rna提取中depc是什麼

2樓:網友

焦碳酸二乙酯(depc):depc即diethypyrocarbonate, 中文名為焦碳酸二乙酯。分子式為c6h10o5,分子量為。

是一種強烈但不徹底的rna酶抑制劑。它通過和rna酶的活性基團組氨酸的咪唑環結合使蛋白質變性,從而抑制酶的活性。depc可以抑制植物細胞上的nscc,即nonselective cation channel (非選擇性陽離子通道)。

是常用的nscc抑制劑。這段介紹在百科上有。

配置:加 depc到去離子水中,混勻過夜,然後高溫高壓121℃, 20min, depc即降解成二氧化碳和水無毒。

用depc處理吸頭離心管什麼的可以使其rnase降解,高溫高壓後吸頭和離心管等就是無rnase和dnase了,做rna實驗操作上要多注意,避免汙染。

3樓:網友

是清除外源性rna酶用的化學品,是致癌物,毒性很強。

建議使用北京華越洋生物生產的替代品,外源rna酶清除劑。無毒,高效,操作簡便,還經濟。

我們常用depc水溶解rna,但是總有些凝膠狀rna無法溶解,會不會是depc水的問題,求高人指點,感謝!

4樓:網友

depc是一種強烈但不徹底的rna酶抑制劑。通過和rna酶的活性基團組氨酸的咪唑環結合使蛋白質變性,從而抑制酶的活性。

就你的情況而言,有些凝膠狀rna無法溶解,是由於提取的rna的樣品不純的問題,不會是depc水的問題,凝膠狀的物質有蛋白質和dna,如果有些發黃的話,蛋白質比較多一些,dna是無色的。

解決的對策有:

1.保證徹底的裂解和一定時間的離心,增加有機溶劑的抽提的次數 或是混勻的時候多混一會。

2:減少處理樣品的量,3;增加漂洗的次數,主要是看你rna凝膠檢測的問題,如果你膠跑出來可以的話就行。

5樓:網友

不是,是你產物的質量不好。凝膠狀的應該是dna,而且是大片段的。

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