如何在轉錄水平 檢測某基因的表達
1樓：杯明有魚
可以使用northern印記法。首先用放射性磷同位素製備與目標基因序列一直的rna探針。然後將目標基因匯入大腸桿菌培養一段時間。
人為裂解大腸桿菌，用冷酸法提取rna。將提取的rna用選擇性內切酶處理後過電泳，使各段rna分開。再將電泳圖譜固定於纖維膜，以製備好的放射性rna探針與之雜交，隨後進行放射性自顯影。
若有顯影印跡出現，則證明大腸桿菌中有與探針rna序列互補的rna被轉錄，進而證明了目標基因的被表達。
2樓：網友
主要有以下方法：
northern blot（電泳後，固定在膜上，與探針雜交）dot blot（將點狀樣品吸印到特定的膜上，常用硝酸纖維素膜，然後與標記探針雜交）
rt-pcr（提取rna後p成dna再檢測，需要設計引物）dna microarray（通常在檢測大量基因表達水平時使用，主要表現基因表達量的上調/下調）
原位雜交（通常用於基因表達在染色體上的定位）
3樓：
抗原-抗體雜交，檢驗是否翻譯出目的基因。
4樓：網友
用定量pcr的方法。
可以看看。
如何檢測目的基因是否轉錄
5樓：禮禎晉睿聰
檢測目的基因是否轉錄通常採用分子雜交的方法。
基因表達分為轉錄及翻譯兩階段，轉錄是以dna（基因）為模板生成mrna的過程，翻譯是以mrna為模板生成蛋白質的過程，檢測外源基因的表達就是檢測特異mrna及特異蛋白質的生成。所以基因表達檢測分鄭敗為兩個水平：即轉錄水平上對特異mrna的檢測和翻譯水平上對特異蛋白質的檢測。
轉錄水平上的檢測主要方法是northern雜交，它是以dna或rna為探針，檢測rna鏈。和southern雜交相同，northern雜交包括斑點雜交和印跡雜交。
也可用rt-pcr（reverse
transcribed
pcr）方法檢測外源dna在植物體內的轉錄表達。其原理是以植物總rna或mrna為模板進行反轉錄轎早，然後再經pcr擴增。
如果從細胞總rna提取物中得到特異的cdna擴增條帶，則表明外閉叢雀源基因實現了轉錄。此法簡單、快速，但對外源基因轉錄的最後決定，還需與northern雜交的實驗結果結合。
如何檢驗目的基因是否轉錄
6樓：學無止境
不是的，樓主。不是把rna染色，是把dna探針進行標記。
然後再進行細胞內的原位雜交或者體外的northern雜交，檢測是否有目的基因轉錄的rna存在。
使用最普遍的探針標記物是同位素， 但由於同位素的安全性，近年來發展了許多非同位素標記探針的方法，多使用甾類化合物地高辛配基（digoxigenin，dig）標記。
如果把rna染色，就無法判斷探針是否與目的基因轉錄的rna結合，也就無法判斷目的基因是否進行了轉錄。
從dna、rna、蛋白水平上各寫出一種鑑定轉基因植株的方法 ？
7樓：惠企百科
在分子水平上來檢驗的是na和dna。
植物細胞經載體法間接或物化法直接轉化後，大部分細胞是沒有轉化的，這就需要將這些未轉化細胞與極少數轉化細胞區別開來，淘汰未轉化細胞，然後利用植物細胞的全能性在適宜培沒的環境條件下，使轉化細胞再生成可育的轉基因植株。
怎樣從rna水平檢測基因表達的變化
8樓：匿名使用者
所謂基因表達，就是從dna到mrna再到蛋白的乙個過程，基因表達水平一般是通過該基因轉錄的mrna的多少來衡量的。每個基因轉錄產生的mrna的量，是受到時空等多種因素調控的，個體在不同的生長發育階段，或者不同的組織水平，基因轉錄出mrna的量都是不一樣的。例如，當某種植物長期生長在高鹽的環境裡，該植物體內與抗鹽相關的基因的表達量就會增加，以適應這種高鹽環境，是植物能夠生存下來，這時植物抗鹽相關的基因表達水平就相對高，希望我的能夠幫你弄清這個問題，
9樓：涼皮兒
佳學-基因 能夠檢測出dna，mrna以及蛋白質各個水平的基因表達。
10樓：金屬熱處理工藝
佳學基因專業與基因檢測和基因解碼。
11樓：回憶不起記憶
基因解碼方面，我只服佳學基因。
從轉錄水平檢測甲胎蛋白基因表達情況的方法有哪些
12樓：匿名使用者
1 western bloting
a.將編碼目標蛋白基因通過載體進行體外重組，然後匯入宿主細胞表達b.將目標蛋白注入兔子或其他動物體內獲得一抗c.
將樣品蛋白進行聚丙烯醯胺凝膠電泳、轉移、吸附固定d.用一抗與之雜交再用二抗檢測其是否表達。
2 fluorescent real-time pcra.提取樣品總rna，再通過超速離心獲得mrnab.用逆轉錄酶獲得cdna
c.加入特異性探針。
d.利用專門的儀器檢測螢光強度即可。
3半定量 pcr
a.提取樣品總rna，再通過超速離心獲得mrnab.用逆轉錄酶獲得cdna
c.做半定量pcr
4cdna microarray
5蛋白質 晶元。
實質就是高通量的分子雜交，免疫酶連反應再運用計算機處理。
免疫螢光染色檢測各基因的表達亮變化怎麼看出來的
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