1樓:看見撒的看見
pcambia系列載體是常用的植物表達雙源載體,載體的骨架是puc18。其中 pcambia1300, pcambia2300均無gus報告專基因,pcambia系列載屬體均含有卡那黴素抗性基因。
pcambia2300特點:
大腸桿菌篩選抗性:卡那黴素。
植物篩選抗性:卡那黴素。
gus基因和gusa基因的區別
2樓:匿名使用者
可以這樣做:根據目的序列設計引物,5' 引物、3' 引物加酶切位點,pcr產物連線pgem-t easy載體,構建目的基因轉殖載體.pgem-t easy不知現在還有沒有賣的,有點貴,但成功率很高.
分別對pcambia 1301和pbi 121雙酶切,將pbi 121 gusa編碼序列連同camv35s啟動子和nos終止子片段反向插入pcambia 1301多轉殖位點,構建帶有gus載體. 選適當的酶酶切自己構建的帶有gus的載體和目的基因cds,構建中間載體,將中間載體camv35s啟動子- 目的基因cds-nos終止子插入片段進行測序驗證,這個35s啟動子來自pbi 121,目的基因cds替換了來自pbi 121中的gusa編碼序列.至此,構建的雙元載體中共有3個camv35s啟動子,分別啟動pcambia 1301中gusa、hpt ii和插入的目的基因cds.
然後轉根癌農桿菌感受態細胞,擬南芥蘸花轉化,用潮黴素篩選,高的是轉化植株,gus染色確認,後續抗旱性驗證. 我想這個過程包含了你提到的幾個問題,酶的選擇根據目的基因序列,用軟體分析一下來確定.這是個真實的實驗,希望能提供參考.
pcambia-1305.1是穿梭質粒嗎?
3樓:匿名使用者
根據廠家的描述,應該
專是的屬:
不同植物中gus基因序列一樣嗎
4樓:匿名使用者
可以肯定不會完全一樣,即使16s/18s等分子鐘基因也會有個別鹼基不同。
差異原因,有2個:
種屬等分類地位不同。
即使同種,不同個體仍有snp差異的。
套用一句名言:」世界上沒有2片完全相同樹葉「
pcambia1305載體上的camv35s啟動子啟動的哪個基因的表達
pcambia1300是hyg抗性基因,在轉基因植物可以用卡那篩選嗎
5樓:又夢駝鈴
卡那篩選一般是用pcambia1300載體骨架構建植物表達載體時進行陽性菌落篩選的,當將相應載體轉到植物中時,卡那基因不會整合到植物基因組中,因此對轉基因陽性幼苗的篩選一般用其含有的潮黴素基因篩選。
pcambia3301上的gus基因會對後續轉基因有影響嗎
6樓:匿名使用者
pcambia3301上的gus基因會對後續抄轉基因有襲影響如果轉基因食品的基因會影響人體,那豈不是吃豬肉就有了豬的基因了?
轉基因食品現在的爭論在於部分轉基因的蛋白質產物不能確定是否對人體有害,比如某些轉基因抗蟲作物的抗蟲蛋白不能確定對人是否有害。以及轉基因作物花粉對野生物種的影響
並不是基因層面的問題,轉基因的基因片段不會轉接到人體的,科學家這麼費勁才把它們搞進去,哪能你一吃就到你細胞裡了?
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