1樓：張曉慶張曉慶
所謂穿梭，即即可以在真核（例如酵母）中複製，又可以在原核（例如大腸桿菌）中複製，既含有真核和原核的複製起始位點
表達質粒載體：質粒載體的意思就是以質粒作為載體（對應的是病毒載體），而表達是這個載體的主要目的是要匯入到受體細胞表達出產物（對應的是轉殖載體）
原核表達載體和真核表達載體的區別
2樓：威海博銳化機
一、表達載體不同：
原核表達載體構建重組表達載體：
1、載體酶切：將表達質粒用限制性內切酶（同引物的酶切位點）進行雙酶切，酶切產物行瓊脂糖電泳後，用膠**kit或凍融法**載體大片段。
2、pcr產物雙酶切後**，在t4dna連線酶作用下連線入載體。
真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體，具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
二、表達實現方式不同：
真核表達載體具有neo基因，可以採用g418來篩選已成功轉染了該載體的靶細胞。這些特殊的結構可以實現目的基因在靶細胞內的穩定表達。
三、獲得目的基因方式不同：
pegfp-n1載體從結構上看，質粒具有很強的複製能力，可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞，這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
原核表達載體獲得目的基因：
1、通過pcr方法：以含目的基因的轉殖質粒為模板，按基因序列設計一對引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點），pcr迴圈獲得所需基因片段。
2、通過rt-pcr方法：提取總rna，以mrna為模板，逆轉錄形成cdna第一鏈，以逆轉錄產物為模板進行pcr迴圈獲得產物。
3樓：匿名使用者
原核載體可以將真核基因表達，但是表達出來的蛋白是沒有活性的，因為缺少翻譯後修飾系統。。。真核的表達載體呢 由於比較大 不適合大量快速擴增，所以要在其載體上構建可以在原核生物 如大腸桿菌中複製的所需的複製原件 。。。。綜上 在應用的時候 要構建 穿梭質粒 可以穿梭於 原核和 真核 呵呵 還有就是 原核表達載體的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
總覺得不夠正確答案 。。。。。有些人緣的蛋白在原核裡沒有蛋白翻譯後修飾，表達後沒有活性，這時候就得在真核裡表......
4樓：匿名使用者
主要是因為原核和真核表達系統所需的表達元件不同。
比如說啟動子，終止子在兩種表達系統中是不一樣的。
帶有真核表達元件的是真核載體，能在真核生物內表達；
帶有原核表達元件的是原核載體，能在原核生物內表達。
兩者都具有的為穿梭載體。
1)真核表達載體和原核表達載體就是能在真核生物或原核生物中表達的載體,它們一般都帶有能在真核生物或原核生物中表達的必需表達元件;
2)真核表達和原核表達的目的都是為了能夠大量獲得自己所需要的目的基因的表達產物,最好有生物活性,以便下一步的實驗需要.
3)原核表達載體一般只能在原核生物中表達外源基因,但有些穿梭載體可以分別在真核和原核生物中表達它們的表達元件.
畢赤酵母的常用載體,尋找帶標籤的真核表達載體！
典型的巴斯德畢赤酵母表達載體載體包含醇氧化酶 1 aox1 基因的啟動子和轉錄終止子 5 aox1和3 aox1 它們被多轉殖位點 mcs 分開，外源基因可以在此插入。此載體還包含組氨醇脫氫酶基因 his4 選擇標記及3 aox1區。當整合型載體轉化受體時，它的5 aox1和3 aox1能與染色體上...
為什麼構建的真核表達載體在真核細胞中不表達
有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。當構建完成後攜帶有訊號肽的時候，一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後，直接表達成熟肽，表達水平明顯提高。所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。是在真核生物細胞中的基因表達載體的元件麼？如果是，元...
我構建了基因的真核表達載體，轉染293T細胞後以空質粒PCDNA3 1及未轉染質粒的孔為對照，還有以PBS
如果293t本身不表達這個蛋白的話，最大的可能是一抗質量不過關 你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常 非特異性吸附 免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷，很難出假的。是目的基因的抗體做的麼？是不是293t本身表達這個蛋白？贏潤生物技術支援 孫永林 加qq1269592...