1樓：丹鑑攲
典型的巴斯德畢赤酵母表達載體載體包含醇氧化酶－1（aox1）基因的啟動子和轉錄終止子（5'aox1和3'aox1），它們被多轉殖位點（mcs）分開，外源基因可以在此插入。此載體還包含組氨醇脫氫酶基因（his4）選擇標記及3'aox1區。當整合型載體轉化受體時，它的5'aox1和3'aox1能與染色體上的同源基因重組，從而使整個載體連同外源基因插入到受體染色體上，外源基因在5'aox1啟動子控制下表達。
畢赤酵母本身不分泌內源蛋白，而外源蛋白的分泌需要具有引導分泌的訊號序列。
而由89個氨基酸組成的釀酒酵母的分泌訊號—α交配因子(α-factor)引導序列已經成功地引導了幾種外源蛋白的分泌。分泌表達載體主要有：ppic9，ppic9k，phil-s1，ppiczα a，pyam75p等。
胞內表達載體主要有：phil-d2，pa0815，ppic3k，ppicz，phwo10，pgapz， pgapza(invitrogen)，ppic3.5k等。
工程菌株y11430，mg1003，gs115 （aox1），km71，**d1168。
畢赤酵母宿主菌常用的有gs115和km71兩種，都具有his4營養缺陷標記。其中，gs115菌株具有aox1基因，是mut+，即甲醇利用正常型；而km71菌株的aox1位點被arg4基因插入，表型為muts，即甲醇利用緩慢型，兩種菌株都適用於一般的酵母轉化方法。
尋找帶標籤的真核表達載體！ 15
2樓：匿名使用者
這個是要看你想用哪套系統了。
這個沒你想象的那麼簡單。現在常用的真核表達系統有三種：畢赤酵母表達系統、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統、腺病毒表達系統。
每一類真核表達系統又包含不同的轉染和表達方式。尤其最常用的昆蟲細胞表達系統，製作重組桿狀病毒就有baculogold系統、bac-to-bac系統等常用的方法。所用的最初的穿梭載體都不一樣。
先多了解一下這方面資訊，選乙個合適的宿主和方便的方法再下手吧。
3樓：uv鏡
一般情況下用真核生物作為載體不是一次性完成的
先要把目的基因接到病毒的dna，再用病毒侵染真核生物，病毒將其dna整合到真核生物的染色體上
畢赤酵母蛋白不表達是什麼原因
1 菌株 用gs115表達不出蛋白，換km71h後，大部分轉殖能表達。2 溫度 在28度和室溫下誘導表達，表達水平可能都不低。3 ph 手冊上用6.0，ph提高到6.8，不表達的蛋白可能就表達出來。bmmy的ph7.0 7.5比較合適。國內外做的最好的rhsa，最適ph大概5 6左右。ph3的時候y...
畢赤酵母表達目的條帶不止一條怎麼回事
畢赤酵母表達時要加蓋瓶塞是為了避免在發酵過程中被汙染 這其中也許會有空氣中的雜菌汙染，也許會被二氧化碳干擾ph，也有可能造成甲醇的揮發 所以畢赤酵母表達時要加蓋瓶塞是為了避免在發酵過程中被汙染 畢赤酵母誘導表達前為什麼不用葡萄糖 有些酵母是表達色素的，比如番茄紅素等等，有可能造成菌體密度差別，只要後...
酵母的種類有哪些，酵母有哪些種類？
1 鮮酵母 fresh yeast 新鮮酵母因含有大量水分，所以必須保持在低溫環境中，使用時隨取隨用，將其與麵粉一起攪拌，即可在短時間內產生發酵作用。可將新鮮酵母存於零下25 冰庫內，儲存期限可延至一年之久，使用時，先取出放置餘常溫下，直至可用手捏碎，方可使用。但這種冷凍方式會使酵母失去10 30 ...