1樓:匿名使用者
轉染(transfection):指真核細胞由於外源dna摻入而獲得新的遺傳標誌的過程.常規轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染(永久轉染)兩大類.
轉染目的:研究你的目的片段到細胞內的表達.
轉染一般是將目的基因構建到某個載體,將構建好的重組質粒匯入細胞中,這樣就能表達你所要的目的蛋白用於後續實驗.
乙個質粒轉染後為什麼表達兩條蛋白帶?
2樓:匿名使用者
可能的原因會很多,首先看純化有沒有問題,或者是細胞對目的蛋白的應激反應,還有就是蛋白的加工與修飾出現問題,有的加工,有的未加工……
3樓:匿名使用者
是不是形成二聚體了?或目的蛋白內部有某個酶的位點,被水解掉一段可能是表達的原因,
可能是酶切的原因,
也可能是雜蛋白純化的原因,
還有可能是電泳的原因。
4樓:匿名使用者
如果你表達的胰島素之類的有多條鏈構成的蛋白,通常會有這種情況會有多條蛋白帶。因為這種方法,蛋白通常不會經過加工和組裝的過程。
5樓:匿名使用者
個人建議問你老闆去……
乙個質粒轉染後為什麼表達兩條蛋白帶
6樓:匿名使用者
轉染(transfection):指真核細胞由於外源dna摻入而獲得新的遺傳標誌的過程.常規轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染(永久轉染)兩大類.
轉染目的:研究你的目的片段到細胞內的表達.
轉染一般是將目的基因構建到某個載體,將構建好的重組質粒匯入細胞中,這樣就能表達你所要的目的蛋白用於後續實驗.需要根據具體情況進行具體分析,推薦從以下角度進行分析: 對細胞表達目的蛋白的時間進行梯度設計,分別取樣然後做sds-page\wb分析; 參考實驗室經驗資料; 嘗試採用磁珠ip試劑盒產品(義翹有相關產品)進行小量樣品的快速純化;
質粒轉染後蛋白表達量低,如何提高? 5
7樓:匿名使用者
質粒沒有儲存好? 既然之前能高 那就還是重新提一下吧
質粒,一般轉染多久可以提蛋白
8樓:匿名使用者
真核細胞轉染麼?一般轉染48h後目的蛋白表達量達到峰值~單根據具體細胞而定~原核細胞體外表達一般是16度過夜誘導~
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