1樓：仙宜然
考馬斯亮藍測定蛋白質濃度是較常用的方法，誤差可儘量減到最小，兆芹需族高畢注意：測定od值。
前，將分光光度計。
提前預熱至少30分鐘，可保證準確性；配製好的考馬斯亮藍溶液應放於4度儲存備用；鹽離子不會影響實驗結果，但去汙劑，如triton x-100，sds等，會嚴重干擾實念啟驗結果。
考馬斯亮藍測定蛋白質含量時應注意什麼？
2樓：生活小沈童
在試劑加入後的5-20min內測定光吸收，因為在這段時間內顏色是最穩定的。測定中蛋白-染料複合物會有少部分吸附於比色杯壁上，測定完後可用乙醇將藍色的比色杯洗乾淨。
利用考馬斯亮藍法分析蛋白必須要掌握好分光光度計的正確使用，重複測定吸光度時，比色杯一定要衝洗乾淨，製作蛋白標準曲線的時候，蛋白標準品最好是從低濃度到高濃度測定，防止誤差。
3樓：網友
考馬斯亮藍溶解性不好，一定要充分溶解；配標曲之前要再混合一下。
其他的就是好好配標曲~注意操作。
4樓：匿名使用者
1．大量的去汙劑如tritonx-100、sds等嚴重干擾測定。
2．蛋白質與考馬斯亮藍g-250結合的反應十分迅速，在2min左右反應達到平衡；其結合物在室溫下1h內保持穩定。因此測定時，不可放置太長時間，否則將使測定結果偏低。
考馬斯亮藍和**中蛋白質通過範德華力結合，反應快速，並且穩定，無法用普通試劑洗掉。待一兩週左右，皮屑細胞自然衰老脫落即可無礙。
5樓：網友
可以看看上海生工的sk3031，sk3041的說明書。
考馬斯亮藍法測蛋白質含量是多少？
6樓：小楓帶你看生活
考馬斯亮藍法測蛋白質含量需要根據殲瞎實際樣本來確定，無法一概而論。
考馬斯亮藍法測也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）又稱bradford法，是 bradford 於 1976 年建立起來的一種蛋白質濃度的測定方法。由於其突出的優點，正得到越來越廣泛的應用。
考馬斯亮藍g-250測定蛋白質含量屬於染料結合法的一種。在遊離狀態下呈紅色，差衫最大光吸收在488nm；當它與蛋白質結合後變為青色，蛋白質-色素結合物在595nm波長下有最大光吸收。
其光吸收值與蛋白質含量成正比，因此可用於蛋白質的定量測定。蛋白質與考馬斯亮藍g-250結合在2min左右的時間內達到平衡，完成反應十分迅速；其結合物在室溫下1h內保持穩定。
該法是1976年bradford建立，試劑配製簡單，操作簡便快捷，反應非常靈敏，靈敏度比lowry法還高4倍，可測定微克級蛋白質含量，虛改腔測定蛋白質濃度範圍為0～1 000μg/ml，最小可測蛋白質，是一種常用的微量蛋白質快速測定方法。
蛋白質含量測定考馬斯亮藍
7樓：愛情破產柒柒柒
蛋白質含量測定考馬斯亮藍亂兆實驗如下：
實驗原理：考馬斯亮藍(coomassie brilliant blue)法測定蛋白質濃度，是利用蛋白質―染料結合的原理，定量的測定微量蛋白濃度的備粗快速、靈敏的方法。這種蛋白質仿陪鎮測定法具有超過其他幾種方法的突出優點，因而正在得到廣泛的應用。
這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質測定法。
考馬斯亮蘭g-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最大吸收峰(lmax)的位置，由465 nm變為 595 nm，溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。通過測定595 nm處光吸收的增加量可知與其結合蛋白質的量。研究發現，染料主要是與蛋白質中的鹼性氨基酸(特別是精氨酸)和芳香族氨基酸殘基相結合。
考馬斯亮藍染色法的突出優點是：靈敏度高，據估計比lowry法約高四倍，其最低蛋白質檢測量可達1 mg。這是因為蛋白質與染料結合後產生的顏色變化很大，蛋白質-染料複合物有更高的消光係數，因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比lowry法要大的多。
測定快速、簡便，只需加一種試劑。完成乙個樣品的測定，只需要5分鐘左右。由於染料與蛋白質結合的過程，大約只要2分鐘即可完成，其顏色可以在1小時內保持穩定，且在5分鐘至20分鐘之間，顏色的穩定性最好。
因而完全不用像lowry法那樣費時和嚴格地控制時間；干擾物質少。
考馬斯亮藍法已經根據標準曲線算出了c（微克），如何算蛋白質含量（微克/克），蛋白樣品是0.25g的葉片加入5ml蒸餾水研磨成漿離心後的上清液，測的時候取的是0.1ml的上清液加了0.9ml蒸餾水稀釋，再加入5ml考馬斯亮藍溶液測的吸光值，算的時候不太清楚這裡的提取液體積指的是哪個體積？還有測定時加樣量指的是0.1ml還是1ml？求解答
8樓：
摘要。您好，親<>
這邊根據您提供的問題，為您查詢到以下：根據您提供的資訊，可以按照以下步驟計算蛋白質含量：計算樣品中蛋白質的微克數：
c（微克）× 體積（ml）= 樣品中蛋白質的微克數其中，c為考馬斯亮藍法測定出的蛋白質濃度，體積為上清液的體積，即5ml。計算樣品中蛋白質的含量：樣品中蛋白質的微克數 ÷ 樣品重量（克）= 蛋白質含量（微克/克）其中，樣品重量為。
將蛋白質含量乘以1000，即可得到蛋白質含量的單位為毫克/克。在測定時，加樣量指的是的上清液加了蒸餾水稀釋，再加入5ml考馬斯亮藍溶液測的吸光值。提取液體積指的是上清液的體積，即5ml。
考馬斯亮藍法已經根據標準曲線算出了c（微克），如何算蛋白質含量（微克/克），蛋白樣品是的葉片加入5ml蒸餾水研磨成漿離心後的上清液，測的時候取的是的上清液加了蒸餾水稀釋，再加入5ml考馬斯亮藍溶液測的中戚讓吸光值，算的時候不太清楚這裡的提取液體積指的是哪個體積？還有測定時加賣局樣量指的是還仔友是1ml？求解答。
您好，親<>
這邊根據您提供的問題，為您查詢租圓到以下：根據您提供的資訊，可以按照以下步驟計算蛋白質含量：計算樣品中蛋白質的微克數：
c（微克）× 體積（ml）= 樣品中蛋白質的微克數其中，c為考馬斯亮藍法測定出的蛋白質濃度，體積為上清液的體積，即5ml。計算樣品中蛋白質的含量：樣品中蛋白質的微克數 ÷ 樣品重量（克）= 蛋白質含量（微克/克）其中，樣弊肢塌品重量為。
將蛋白質含量乘飢衡以1000，即可得到蛋白質含量的單位為毫克/克。在測定時，加樣量指的是的上清液加了蒸餾水稀釋，再加入5ml考馬斯亮藍溶液測的吸光值。提取液體積指的是上清液的體積，即5ml。
我測出了樣品在595nm處吸光度值，並且根納悉據測定的標準曲線求出了c，這個c代表的含義，我不是特別清楚，代入上圖的公式求出了c，在代入上圖第乙個公式求蛋白質含量的時候，我不太清楚vt（提取液體積ml)是指哪豎巨集個體積，洞纖乎vs（測定時加樣量ml)是指1ml還是？
您好，親<>
這邊根據您提供的問題，為您查詢到以下：c代表的是樣品中蛋白質的濃度，單位為mg/ml。在代入第乙個公式求蛋白質含量時野老，vt指的是提取液蠢脊冊的總體積，即樣品加入的蒸餾水的帶巨集體積加上提取液的體積，一般為指的是測定時加入考馬斯亮藍溶液的樣品體積，一般為。
考馬斯亮藍法測蛋白濃度，具體步驟有哪些，需要什麼試劑？
9樓：網友
你參考一下這個，很詳細的。
影響考馬斯亮藍法測定蛋白質的因素有哪些
10樓：北京索萊寶科技****
去汙劑，鹼液，還有鹼性的多糖殼聚糖等會影響測定；蛋白標準液最好現配現用；平行操作；顯色後在半小時內測完。
考馬斯亮藍法測定蛋白質含量實驗中,使用的水一定是蒸餾水嗎?為什麼？
11樓：網友
考馬斯亮藍法測定蛋白質含量實驗中，使用的水最低要求是蒸餾水，更高精度要求可能會使用雙蒸水。
因為bradford檢測中要用的試劑配製，標準曲線的製作都要用到水。如果不是使用蒸餾水，可能水裡面會有一些遊離的離子或者電解質，會影響試劑配製的準確性，干擾實驗結果。而水中殘留的有機物等可能會和考馬斯亮藍髮生變色反應，這樣製作的標準曲線會比實際值偏高，導致最終濃度檢測的結果比實際結果偏低。
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