1樓:網友
水飽和酚和tris飽和酚( phenoi water/tris-phenol)的區別:
一、水飽和酚又叫水平衡酚。水飽和酚的ph小於7,一般是ph為左右,通常與異硫氫酸胍一起使用,用於細胞rna的提取,在酸性環境中,dna在酚相,rna在水相。兩者就分開了。
二、tris飽和酚一般ph大於,用於dna的提取。其中,酚是強的蛋白變性劑,可以使細胞或組織中的蛋白質變性析出。 而tris的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會形成醌(兩個苯環),醌含有強自由基,會破壞核酸結構。
同時,由於ph值大於7,在鹼性環境中dna處於水相,rna處於有機相。從而分離上清,即可得到dna。
tris飽和酚的配置:
1、冰箱取出重蒸酚,室溫放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂。
2、加8-羥基喹啉至和β-巰基乙醇至,(原液14. 4mol/ml),混勻,溶液呈現黃色,倒入分液漏斗中(也可在燒杯中進行)
3、加入等溶劑的1mol/ml的tris(,反覆混勻後,靜至分層;放出下層黃色酚液,棄上層。
4、加固體tris約1g/100ml酚,搖勻,去水相。
5、加平衡數次,至ph為。
6、加於棕色瓶中4度儲存。
7、如黃色消失或呈粉紅色(說明酚已經被氧化),則不能使用。
2樓:網友
有的。水飽和酚裡面只有酚和水。
tris-hcl飽和酚裡面有酚和水外,還有tris-hcl作為緩衝劑存在。
3樓:網友
tris-hcl是一種緩衝體系,tris-飽和酚能保證酚溶液在一種穩定ph環境下發揮作用;而水不具備緩衝能力。
4樓:中的男人
tris-hcl飽和酚有一定的酸鹼緩衝作用。
為什麼要用ph8的tris水溶液飽和酚?呈粉紅色的酚可否使用
5樓:匿名使用者
為什麼要用ph8的tris水溶液飽和酚。
市售酚中含有醌等氧化物,這些產物可引起磷酸二酯鍵的斷裂及導致rna和dna的交聯,應在160℃用冷凝管進行重蒸。重蒸酚加入的8-羥基喹啉(作為抗氧化劑),並用等體積的 tris·cl (和 tris·cl(緩衝液反覆抽提使之飽和並使其ph值達到以上,為tris飽和酚(左右)。
飽和酚在核酸純化中有2種,一種為tris飽和酚(左右),故也稱為鹼性酚。另一種就是酸性酚,也就是水飽和酚。用於rna提取時,則要製備酸性酚,也就是水飽和酚,因為在酸性條件下,rna被分配於水相,而dna在有機相,從而達到分離獲得rna的目的。
水飽和酚同時能使蛋白質變性、沉澱,從核酸提取液中將蛋白質分離除去。因此,ph值不同,應用不同,切不可弄混,以免造成實驗失敗。
tris飽和酚詳細配法 tris飽和酚詳細配法,
6樓:道楊接曉君
1、取出重蒸酚,室溫放置68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂。
2、加8-羥基喹啉至和β-巰基乙醇至原液 mol/ml),混山睜勻,溶液呈現黃色,倒入分液漏斗中(也可在燒杯中進行).
3、加入等溶劑的1 mol/ml的乎唯洞tris(,反覆混勻後,靜至分層;放出下層黃色酚液,棄上層。
4、加固體tris約1 g/100 ml酚,搖勻,去水相。
5、歲枯加 mol/mltris(ph 平衡數次,至ph為6、加 mol/mltris(ph 於棕色瓶中4度儲存。
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