纖維素酶活的活性檢測方法及使用說明是什麼

2023-02-26 06:20:03 字數 3198 閱讀 4910

1樓:網友

1. 纖維素cmc酶。

標題。用一二硝基水楊酸法測定纖維素cmc酶活性單位。 範圍。

生產分析和質量控制部門適用。 原理。

纖維素cmc酶(

4)水解羧基纖維素分子中β-葡萄糖苷鍵,釋放出的還原糖(以葡萄糖計)與二硝基水楊酸(dns)反應,產生顏色變化,這種顏色變化與釋放還原糖(以葡萄糖計)的量成正比關係,即與酶樣品中的酶活性成正比。

通過在550nm的光吸收值查對標準曲線(以葡萄糖為標準物)可以確定還原糖產生的量,從而確定出酶的活力單位。 試劑。

無水醋酸鈉(分析純) 冰醋酸(分析純) 二硝基水楊酸 無水葡萄糖。

四水酒石酸鉀鈉(分析純) 氫氧化鈉(分析純) 4.

7重蒸苯酚(分析純) 無水亞硫酸鈉(分析純) 疊氮化鈉(分析純) 4.

10羧甲基纖維素鈉 儀器。

水浴鍋(恆溫)50±1℃ 電熱乾燥箱80±1℃ 5.

3 722型分光光度機計 分析天平感量 5.

5一級玻璃製品 電冰箱 6.0試劑的準備。

6.1乙酸-乙酸鈉緩衝溶液(ph=

溶液a:量取冰醋酸6ml,定容至1000ml,製成醋酸鈉溶液。

溶液b:稱取醋酸鈉,溶解後容至1000ml,製成0.

1m醋酸鈉溶液。 以a:b=4:

6的比例混合,低溫冷藏備用。 dns試劑:

溶液a:稱分析純naoh 104g溶於1300ml水中,加入30g分析純一二硝基水楊酸。

溶液b:稱分析純酒石酸鉀鈉910g,溶於2500ml熱水中,再稱取25g重蒸苯酚和25g無水亞硫酸鈉加入酒石酸鉀鈉溶液。

將a、b溶液混合,定容至5000ml,貯存於棕色瓶中,暗處放置一星期後可使用。 cmc溶液:

用羧甲基纖維素鈉(cmc)以醋酸緩衝液配成1%的溶液。 7.0標準曲線製作:

無水葡萄糖80℃烘乾至恒重。

準確稱取溶於1000ml水中,加10mg疊氮化鈉防腐,4℃冷藏備用。 標準葡萄糖曲線製作。

2樓:匿名使用者

1 酶的活力測試方法現狀:�纖維素酶是由黴菌等培養得到的乙個自然的多組份混合物,它的生物催化作用可以使纖維素纖維發生水解,有效地控制水解速度和水解率可以得到纖維素纖維織物的不同處理要求,纖維素酶對纖維素纖維的作用分四個程式;滲入,內切,外切,糖化。�滲入決定於酶的分子量大小和纖維的內表面可及度,內切(在任意部位把纖維素苷鍵切斷)主要決定於組份中cx酶的活力,外切(在纖維素的一端順序切下乙個個雙醣)主要決定於c1酶的活力,糖化決定於把多醣轉化為單醣的葡萄糖酶co的活力。

多種組分的各自活力和協調構成了單位時間內纖維素纖維的降解糖化量,酶的活力測定對織物酶處理工藝設計有重要意義。� 酶的活力測定,有稱作催化活力測定,測定方法有;濾紙崩潰法,總糖比色法,粘度法……等。濾紙崩潰法屬於定性檢測,總糖比色法重點反映c1與co的協調作用,粘度法重點反映cx與c1的協調作用,兩者都可以用作定量測定。

至今活力測定尚未有統一的方法,表示活力大小的計量單位更是多種多樣,丹麥novodisk(諾和諾得公司)早期採用總糖比色法(af187.2/1-gb 82-08-10)一分鐘水解產生1μmol葡萄糖稱為乙個ncu活力單位(ncu=novo cellulase unit)。後來又採用粘度法(af275/1-gb 1989-02-03)用一種活力為880egu的內切葡聚醣酶,以其作用於cmc的粘度曲線為對比標準,測得的對應值以egu/克作為乙個內切酶活力單位(egu=endo glucase unit)。

3樓:實翎生爰

土壤樣品應為<2mm,即過10號篩,我們常用20目篩。

纖維素酶活力用什麼方法測定

4樓:砂粒

纖 維 素 酶 是 一 種 復 合 酶 。 酶 系 包 括 外 切 葡 聚 糖 酶 ( exob-1.

4glucanase,9 ) 內 切 葡 聚 糖 酶 ( endo β ec1.

和纖維二糖酶。

纖維素酶在一定溫度和 ph 條件下, 將纖維素酶底物(濾紙或羥甲基纖維素鈉)水解,釋放出還原糖。在鹼性,煮沸 條件下,二硝基水楊酸(dns 試劑)與還原糖發生顯色反應,其顏色的深淺 與還原糖(與葡萄糖汁)含量成正比。

通過在 540nm 測定吸光度,可得到產生還 原糖的量,計算出纖維素酶的 fpa 酶和 cmca 酶活力,以此代表纖維素酶的酶活 力。

纖維素酶活力用什麼方法測定?

5樓:覺瘩

纖維素酶是一種多組分酶, 包括c1 酶、 cx 酶和�0�7�0�0-葡萄糖苷酶三種主要組分。 其中c1酶的作用是將天然纖維素水解成無定形纖維素,cx 酶的作用是將無定形纖維素繼續水解成纖維寡糖,�0�7�0�0-葡萄糖苷酶的作用是將纖維寡糖水解成葡萄糖。纖維素酶水解纖維素產生的纖維二糖、葡萄糖等還原糖能將鹼性條件下的3,5-二硝基水楊酸(dns)還原,生成棕紅色的氨基化合物,在540nm 波長處有最大光吸收, 在一定範圍內還原糖的量與反應液的顏色強度呈比例關係, 利用比色法測定其還原糖生成的量就可測定纖維素酶的活力。

誰知道纖維素酶酶活測定的具體方法?詳細說一下吧!非常感謝啊!!!!

6樓:諸飛傑

將該酶利用接種環接種到纖維素培養基上,過一段時間,觀察培養基的變化,如果有變化,講明該酶是活的,否則就是死的了!好像我對你的問題不是很理解,我回答的如果不是你想問的問題,請原諒哇!

求助:纖維素合成酶 酶活性測定方法

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纖維素酶 檢測方法 諾維信

7樓:靳大熊

天津諾維信怎麼樣啊?

請問要是纖維素酶失去活性的具體方法有哪些?

8樓:婷

酶的活性一般取決於溫度、ph值等,若果想使其失去活性,一般情況下,溫度達到一定的高度(比如人體內的酶活性最好是37攝氏度左右,溫度達到5、60就會失去活性而且不會恢復)

如果是想使其暫時失去活性應該是降溫。

9樓:匿名使用者

酸性纖維素只需要改變ph就好了。

中性纖維素酶的話,就需要加使蛋白變性的變性質。

公升溫也可以,但是70℃處理半個小時通常都會有小部分酶能留下來。

10樓:匿名使用者

高溫,過度的酸鹼都會使其變性。

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