1樓：阿才小狗
培養基（medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養基還含有抗菌素和色素。
按所用原料不同，可分為兩類：應用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配製的，稱為天然培養基；應用化學藥品配成並標明成分的，稱為合成培養基或綜合培養基。化學試劑中的培養基，大多為合成培養基。
由於液體培養基不易長期保管，現在均改制成粉末。培養基由於配製的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮後，易被細菌汙染或分解變質，因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處儲存。
對一些需嚴格滅菌的培養基（如組織培養基），較長時間的貯存，必須放在2~6。c的冰箱內。
常見培養基有：
1、細菌培養基
配方一 牛肉膏瓊脂培養基
牛肉膏0.3克 ，蛋白腖1.0克，氯化鈉 0.5克，瓊脂 1.5克，
水 100毫公升
在燒杯內加水100毫公升，放入牛肉膏、蛋白腖和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號後，放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解後，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解後補足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整ph值到7.
2～7.6,分裝在各個試管裡，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌30分鐘。
配方二 馬鈴薯培養基
取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細細剁成肉末後，加入500毫公升蒸餾水和5克蛋白腖。在燒杯上做好記號，煮沸，轉用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末乾燥處理，濾液ph值調到7.
5左右。每支試管內加入10毫公升肉湯和少量碎末狀的幹牛心，滅菌，備用。
配方三 根瘤菌培養基
葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克
碳酸鈣 3克 硫酸鎂 0.2克
酵母粉 0.4克 瓊脂 20克
水 1000毫公升 1%結晶紫溶液 1毫公升
先把瓊脂加水煮沸溶解，然後分別加入其他組分，攪拌使溶解後，分裝，滅菌，備用。
2、放線菌培養基
配方一 澱粉瓊脂培養基（高氏培養基）
可溶性澱粉 2克 硝酸鉀 0.1克
磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克
硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克
瓊脂 2克 水 100毫公升
先把澱粉放在燒杯裡，用5毫公升水調成糊狀後，倒入95毫公升水，攪勻後加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解後，補足失水。調整ph值到7.
2～7.4，分裝後滅菌，備用。
配方二 麵粉瓊脂培養基
麵粉 60克 瓊脂 20克
水 1000毫公升
把麵粉用水調成糊狀，加水到500毫公升，放在文火上煮30分鐘。另取500毫公升水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解後，把兩液調勻，補充水分，調整ph值到7.4，分裝，滅菌，備用。
3、真菌培養基
配方一 薩市（sabouraud』s）培養基
蛋白腖 10克 瓊脂 20克
麥芽糖 40克 水 1000毫公升
先把蛋白腖、瓊脂加水後，加熱，不斷攪拌，待瓊脂溶解後，加入40克麥芽糖（或葡萄糖），攪拌，使它溶解，然後分裝，滅菌，備用。
本培養菌是培養許多種類真菌所常用的。
配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基
把馬鈴薯洗淨去皮，取200克切成小塊，加水1000毫公升，煮沸半小時後，補足水分。在濾液中加入10克瓊脂，煮沸溶解後加糖20克（用於培養黴菌的加入蔗糖，用於培養酵母菌的加入葡萄糖），補足水分，分裝，滅菌，備用。
把這培養基的ph值調到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。
配方三 黃豆芽汁培養基
黃豆芽 100克 瓊脂 15克
葡萄糖 20克 水 1000毫公升
洗淨黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶解後放入糖，攪拌使它溶解，補足水分到1000毫公升，分裝，滅菌，備用。
把這培養基的ph值調到7.2～7.4，可用來培養細菌和放線菌。
配方四 豌豆瓊脂培養基
豌豆 80粒 瓊脂 5克
水 200毫公升
取80粒幹豌豆加水，煮沸1小時，用紗布過濾後，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用。
4、食用菌菌種培養基
配方一 馬鈴薯—蔗糖--瓊脂培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000毫公升
蔗糖 20克 瓊脂 18克
把馬鈴薯洗淨去皮後，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200克，加水1000毫公升，煮沸20分鐘後，過濾。在濾汁中補足水分到1000毫公升，即成20%馬鈴薯煮汁。
在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解後，補足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養基對ph值要求不嚴格，可以不測定。
配方二 綜合馬鈴薯培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000 毫公升
磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克
葡萄糖 20克 維生素 10毫克
瓊脂 18克
先配製20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解後補足水分，調整ph值到6。分裝，滅菌，備用。 該培養基用於培養和儲存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。
5.菸草的培養基
在植物組織培養時,通過調節iaa和ctk的比值能影響愈傷組織分化出根或芽.ctk/iaa高時,愈傷組織分化芽
ctk/iaa低時,分化根;ctk/iaa比例適中維持愈傷組織不分化
愈傷組織誘導培養基製備
以ms培養基母液為基礎,向潔淨鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100ml,微量元素100×母液20ml,鐵鹽100×母液20ml ,維生素100×母液20ml,肌醇200×母液10ml,甘氨酸200×母液10ml,配製得ms培養基後,再加入0.5mg·l-1的ba8ml,0.5mg·l-1的naa8ml.
然後加入實際配製培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖後攪拌使其溶化,用0.5mol·l-1的naoh和0.5 mol·l-1的hcl調整ph值至5.
8-6.0.加入14g瓊脂,將鋁鍋置於電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然後用蒸餾水定容至終體積2l,繼續加熱幾分鐘使之混合均勻後分裝於三角瓶中.
菸草葉片愈傷組織誘導
取一無菌培養皿,用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置於無菌培養皿中,並用解
剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然後將其接種於準備好的培養基上,每瓶接種
5小片,一共接種6瓶.接種後的三角平置於24條件下黑暗培養1周,然後在同
樣溫度下有光照和全黑暗下培養3周直至愈傷組織形成(兩種情況各置3瓶).觀
察愈傷組織誘導結果,統計愈傷組織誘導率.
器官分化及植株再生培養
將誘導的愈傷組織按型別分別轉入分化培養基上,置於連續光照,溫度20-22 c條件下培養3周,統計愈傷組織再生植株情況.
愈傷組織誘導的總體情況
菸草愈傷組織誘導培養4週後,愈傷組織基本形成,即排除因生長時間不夠而
未形成愈傷的情況.具體情況見表一中所示,6瓶培養物均有愈傷形成,且都未發
生汙染,但誘導率幾乎各不相同.其中, 在光照條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為
60.0℅, 在黑暗條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為46.7%.由於實驗過程中,外植
體即菸草葉片取得偏小,接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡,使整
個實驗的愈傷組織誘導率偏低,愈傷塊偏小.
培養基還有:1640培養基
特殊培養基：
一 選擇性培養基
1酵母菌富集培養基
葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化銨0.1% 磷酸二氫鉀0.25% 磷酸氫二鈉0.05% 七水合硫酸鎂0.1% 七水合硫酸鐵0.01% 酵母膏0.05%
孟加拉紅0.003% ph4.5
2 ashby無氮培養基 富集好養自生固氮菌
甘露醇1% 磷酸二氫鉀0.02% 七水合硫酸鎂0.02% 氯化鈉0.02%
二水合硫酸鈣0.01% 碳酸鈣0.5%
二 鑑別培養基
emb培養基，常用於鑑別e.coli
蛋白腖 10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氫二鉀2g 伊紅y 0.4g 美藍0.065g
蒸餾水1000g ph7.2
分離海洋微生物的培養基配方
2216e培養基配方（固體培養基）
蛋白腖 5克
酵母膏 1克
磷酸高鐵 0.01克
瓊脂 15-----20克
陳海水 1000毫公升
煮沸氫氧化納（5%）的溶液調ph值7.6—7.8
其他培養基：
1.高氏一號培養基
kno3:1g,
nacl:0.5g,
k2hpo4:0.5g
mgso4·7h2o：0.5g
feso4·7h2o：0.01g
可溶性澱粉20g
瓊脂20g
蒸餾水1000ml
ph調至7.2~7.4，121°c滅菌30min
制法：先用少量水將澱粉調成糊狀，再取700ml水在電爐上加熱煮沸
然後邊攪拌便將澱粉糊倒入，同時保持沸騰。然後再將其他成分加入，
溶解後補足水分至1000ml
肉湯蛋白腖斜面：
蛋白腖10g
牛肉膏5g
蒸餾水1000ml
nacl：5g
ph：7.0~7.2，121℃滅菌20min
如配製固體培養基需加瓊脂1.5%~2%,半固體培養基可加瓊脂0.5%~0.8%
不同的細胞培養基
天然細胞培養基
天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期，體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由於天然培養基製作過程複雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養基所替代。
目前廣泛使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。
血清種類
目前用於組織培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因：**充足、製備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。
牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但並不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。
牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。
顯然，胎牛血清是品質最高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。
血清的主要成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很複雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
血清主要作用
1. 提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。
2. 提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激素（氫化可的松、地塞公尺松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
3. 提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
4. 提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。
5. 對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。
這種作用是偶然發現的，現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用於貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時，粘度起到重要作用。
血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如seo3,硒等。
血清培養基主要問題
1. 血清的成份可能有幾百種之多，目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難。
2. 血清都是批量生產，各批量之間差異很大，而且血清儲存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續性受到限制。
3. 對大多數細胞，在體內狀態，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷癒合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態，血清可能促進某些細胞的生長（成纖維細胞）同時抑制另一類細胞生長（表皮細胞）。
4. 血清含一些對細胞產生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。
5. 動物個體不同，血清產地、批號不同，每批質量差異甚大，其成分不能保持一致。
6. 取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產生潛在影響，可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。
7. 大規模生產中，血清**越來越困難，**昂貴，是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。
血清的質量標準
血清質量高低取決於兩方面因素：一是取材物件，二是取材過程。用於取材的動物應健康無病並且在指定的出生天數之內，取材過程應嚴格按照操作規程執行，製備出的血清要經過嚴格的質量鑑定。
who公布的《用動物細胞體外培養生產生物製品規程》中的要求：
1. 牛血清必須來自有檔案證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。並應具備適當的監測系統。
2. 有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。
3. 證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。
4. 血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。
5. 無細菌、黴菌、支原體和病毒的汙染，有些國家要求無細菌噬菌體汙染。
6. 對細胞有良好的支援繁殖作用。
我國在對牛血清的質量2023年版《中國生物製品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量，細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素，支援細胞增殖檢查。
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