磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程

2022-02-04 08:58:20 字數 1784 閱讀 6114

1樓:北京索萊寶科技****

磁珠法核酸提取過程:

1、裂解

取抗凝全血到1.5mlep管中,加入buffera、bufferb,混合均勻。然後把ep管置於恆溫水箱中溫育15~20min。

2、結合

將ep管從溫育裝置中取出,離心後取上清,加入振盪混勻的磁珠結合液,顛倒混勻。將ep管置於磁力架上進行磁分離,棄廢液(吸淨管蓋及管底殘液)。

3、洗滌

⑴ 加入洗滌液ⅰ,點振數次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數及力度),然後磁分離,吸淨管蓋及管底的殘液;

⑵ 加入洗滌液ⅱ,點振數次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數及力度),然後磁分離,吸淨管蓋及管底的殘液;

⑶ 重複步驟⑵一次;

⑷ 室溫下開蓋乾燥。

4、洗脫

加入洗脫液,放置水浴鍋中溫育後磁分離,小心吸取上清液至新的ep管中,進行下游實驗。

2樓:

取10-20mg左右的組織,用液氮研磨為粉末,轉入1.5ml 離心管內,加入100 μl 生理鹽水,振盪15秒 (或直接在100 μl 生理鹽水中將組織勻漿為細胞懸液),加入200 μl 裂解液, 20 μl biog復合消化液,充分混勻,56℃溫育12分鐘(如組織勻漿不充分,可適當延長消化時間至組織完全消化)。

↓冷卻到室溫,加入300μl異丙醇,充分混勻,再加入20μl磁珠復合液(每次使用前須充分混勻),振盪混勻3min(注意不要顛倒混勻,以防磁珠粘附於管蓋內壁),靜置2min。

↓將離心管置於磁力架上放置約20s至磁珠完全吸附,開蓋,徹底吸棄上清液(注意槍頭不要接觸磁珠)。

↓加入800μl配製後的洗滌液,將離心管從磁力架上取下,充分振盪2min,確保磁珠完全分散。將離心管置於磁力架上放置約20s至磁珠完全吸附,開蓋,徹底吸棄上清液(注意槍頭不要接觸磁珠)。

↓將離心管從磁力架上取下,開蓋,乾燥約3-5min,至無明顯乙醇氣味。

↓加入50-100 μl洗脫液,振盪至磁珠充分散開,室溫靜置2min,再振盪混勻1min。

↓將離心管置於磁力架上,待磁珠完全吸附後,小心吸取上清液至一新的1.5ml離心管中,提取的核酸可直接用於下游實驗,或-20℃儲存備用。

3樓:匿名使用者

biog磁珠法核酸提取試劑盒可用於血液、組織勻漿液、細胞懸液、拭子涮洗液、血漿、血清、乳液、腹水、尿液等樣本中dna或rna的提取純化, 可手工採用磁力架操作,也可配套自動化提取儀使用。操作簡便快速,只需20多分鐘即可完成全部提取操作。

4樓:一七九

磁珠法核酸提取一般可以分為四步:裂解——結合——洗滌——洗脫。

磁珠法dna提取試劑盒中用到的是什麼型別的磁珠

5樓:匿名使用者

磁珠法核酸提取過程:

1、裂解

取抗凝全血到1.5mlep管中,加入buffera、bufferb,混合均勻。然後把ep管置於恆溫水箱中溫育15~20min。

2、結合

將ep管從溫育裝置中取出,離心後取上清,加入振盪混勻的磁珠結合液,顛倒混勻。將ep管置於磁力架上進行磁分離,棄廢液(吸淨管蓋及管底殘液)。

3、洗滌

⑴ 加入洗滌液ⅰ,點振數次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數及力度),然後磁分離,吸淨管蓋及管底的殘液;

⑵ 加入洗滌液ⅱ,點振數次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數及力度),然後磁分離,吸淨管蓋及管底的殘液;

⑶ 重複步驟⑵一次;

⑷ 室溫下開蓋乾燥。

4、洗脫

加入洗脫液,放置水浴鍋中溫育後磁分離,小心吸取上清液至新的ep管中,進行下游實驗。

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