當質粒加入宿主細胞進行轉化,為什麼在塗佈含有Amp的LB培養基平板前要在LB培養基

2021-04-18 20:08:17 字數 848 閱讀 3936

1樓:浙大阿公尺巴

要在培養基中37℃活化一小時?

因為要讓大腸桿菌恢復活力以及適應培養基,微生物在環境改變的時候會進入一段適應期,產生所需要的酶系以便於在新的培養基中生存。

2樓:壞蛋走走

剛做完轉化,質粒在細菌中還不能表達,要給他一段時間繁殖之後才具有抗性,這就是所謂的表型延遲.

質粒加入宿主細胞進行轉化,為什麼

3樓:翰林學庫

載體與插入片段連線好後 進入宿主細胞轉化 這個時候已經有了一次轉化 為什麼到後面又要轉化呢?

將載體與插入片段連線上之後,進入到宿主細胞轉化:a:200ul感受態細胞加入連線產物後 輕輕混勻 冰上放置30分鐘 42度水浴90秒 冰浴2分鐘 加入200ullb液體培養基 37度搖床30分鐘 然後塗板 4度冰箱 在往後是質粒dna的轉化 就是把連線產物換成了puc19質粒了,其他步驟都一樣 請問這是為什麼呢?

那感受態細胞加入連線產物培養出的菌落跟感受態加入質粒培養出來的菌落,用哪個呀? 我的意思是篩選出重組子轉殖是要從感受態細胞加入連線產物培養出的菌落選呢?還是感受態加入質粒培養出來的菌落裡選呢?

要是兩個裡面都有選哪個比較好,選出來了之後要質粒小量提取了嗎?要從上面兩個菌裡哪個裡提取呢??重點就是感受態細胞加入連線產物培養出的菌落跟感受態加入質粒培養出來的菌落哪個是質粒小提要提取的呢??

質粒加入宿主細胞進行轉化,為什麼在塗佈含有a

4樓:匿名使用者

一般認為,感受態細胞製備過程和質粒轉化過程會使宿主細胞活力受損,所以在轉化完後,會在lb培養基中活化一小時,使細胞恢復活力.

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