1樓:匿名使用者
如何將目的基因連來
接到t載體進行源測序
解決辦法:1、cla1是乙個比較不常見的酶,可能酶切體系和ecor1的緩衝體系不一樣,試著分別酶切,就是先切cla1,然後純化後切ecor1;或者查詢哪個酶的酶切效率高些,那個後切;2、3個小時可能太短了,我一般都是5個小時,或者過夜;3、可能是你菌挑錯了,或汙染了,重新調菌或者把原來構建成功的質粒進行轉化,再酶切.
t 載體與 目的基因連線成功,測序結果也正確。從新搖菌,提取質粒,在進行雙酶切,一直切不下來。
2樓:匿名使用者
解決辦法:bai1、cla1是乙個比較不常見的酶,du可能酶切體系和
zhiecor1的緩衝dao體系不一樣,試著分別回酶切,就是先切cla1,然答後純化後切ecor1;或者查詢哪個酶的酶切效率高些,那個後切;2、3個小時可能太短了,我一般都是5個小時,或者過夜;3、可能是你菌挑錯了,或汙染了,重新調菌或者把原來構建成功的質粒進行轉化,再酶切。希望對你有幫助。
3樓:郭海強
可能是你酶的問題哦,加入酶失活了,切乙個星期都沒用,建議換另外實驗室的試一下。
4樓:匿名使用者
你的引物含有clai的酶切位點嗎?用載體上的其他酶切位點,雙酶切鑑定下看看。也許酶有問題
連線t載和不連t載測序結果不一樣怎麼辦
5樓:韓小霞
一般來說,一bai段基因序列經過克du
隆後,轉殖zhi到載體中進行測序dao。在兩個層次上發內生變化。首先在
容pcr擴增的過程中可以產生錯誤。將片段插入到載體中也可能發生突變.其次測序準確率的問題。
abi公公司承諾其儀器的測序準確度在一定範圍內可以達到98.5%以上。由於準確率的限制,在乙個較長的序列中發生鹼基序列錯誤時難以避免的,在確認轉殖準確無誤的情況下,通過雙向測序可以最大限度減少測序的錯誤。
您如果想得到最準確的序列,進行雙向測序時必要的。只進行單項測序,無法保證序列的完全準確性,這是由儀器的精確度決定的.
至於終止密碼子是否在測序上的看您的終止子是否在這一片段上即終止子位置.假若不再這一段序列當然不能找到.
6樓:匿名使用者
測序結果不一致,這個直接諮詢給你測序的公司就行了。如果測序結果可信度高,這個相似性就太低了。
測序完成後是否有終止密碼子就要看你測序的這一段是否包含了終止密碼子了,這個需要你自己分析。
我有基因片段老是正向連線到PMD18 T載體上，我現在想要它反向連線上去，有什麼好的方法嗎
在插入序列2端用pcr連線上不同的酶切位點 和載體的位置相對 用酶處理pcr產物和載體，然後再連線就可以了。要麼你像樓上說的那樣，做定向轉殖 我想你的本意就是要避免換個引物再亞轉殖一次，所以你 內只能多篩一些轉殖容，可以用 m13f 你特異基因的f引物 批量做菌落pcr驗證 或m13r 特異基因的r...
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手機供電不能直接驅動行動硬碟，不過可以藉助usb hub實現外接移動電源供電的情況下連線行動硬碟，但這種方法iphone並不適用 您還可以藉助專為手機設計的u盤直接與手機連線。具體地 1 行動硬碟可以與手機連線，不過由於手機供電不足，不能直接驅動行動硬碟，因此需要藉助usb hub分線連線，一個用於...
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