1樓:匿名使用者
磨碎,酒精溶解再層析
2樓:different不同
3樓:憶青個人回憶
可以查一下資料呀,生物要靠自己去想,去學的。
4樓:熬到最後再說
你是實驗室還是大製作,
實驗室比較簡單用層析柱,也還有其他方法。工業不懂
葉綠素的提取用什麼方法 是提取不是分離
5樓:匿名使用者
提取,溶劑萃取法
分離,紙層析法
6樓:匿名使用者
實驗原理:葉綠體色素溶解於機溶劑,酒精或丙酮(相似相溶),根據原理葉綠體色素提取,形色素液.四種色素層析液溶解度同,隨層析液濾紙擴散速度同,溶解度越高,擴散速度越快,溶解度越低,擴散速度越慢.
根據原理使各種色素離. 實驗步驟: 1.
提取綠葉色素: 取材:稱取2g菠菜葉片.
剪碎綠葉:稱葉片剪碎放入研缽. 研磨:
加入少許石英砂(二氧化矽)碳酸鈣及5ml丙酮,迅速研磨.再用5ml丙酮淋洗. 濾:
研磨液濾試管,並及用棉塞塞緊試管口 2.製備濾紙條:準備6cm、寬1cm乾燥濾紙條,剪端兩角,距離該端約1cm處用鉛筆畫條細線 3.
畫濾液細線:用毛細吸管吸取少量研磨濾液,沿鉛筆畫線畫條細直濾液細線,吹乾再重複畫濾液細線若干,每畫線都要吹乾再畫. 4.
離色素:畫濾液細線濾紙條輕輕插入盛3ml層析液(由航空汽油丙酮按10:1比例配製)燒杯,並覆蓋燒杯.
濾液細線能觸及層析液. 5.觀察結:
注意觀察濾紙條變化,幾鐘,取濾紙條仔細觀察.
葉綠素的提取和分離
7樓:匿名使用者
一 實驗目的
1.掌握提取葉綠素的方法
;2.了解薄層層析的原理,掌握薄層層析的一般操作和定性鑑定方法
二 實驗原理
1.葉綠素提取
高等植物體內的葉綠體色素有葉綠素和類胡蘿蔔素兩類,主要包括葉綠素a (c55h72o5n4mg)、葉綠素b(c55h70o6n4mg)、β—胡蘿蔔素(c40h56)和葉黃素(c40h56o2)等4種。葉綠素a和葉綠素b為吡咯衍生物與金屬鎂的配合物,胡蘿蔔素是一種橙色天然色素,屬於四萜類,為一長鏈共軛多烯,有α、β、γ三種異構體,其中,β異構體含量最多。葉黃素為一種黃色色素,與葉綠素同存在於植物體中,是胡蘿蔔素的羥基衍生物,較易溶於乙醇,在乙醚中溶解度較小。
根據它們的化學特性,可將它們從植物葉片中提取出來,並通過萃取、沉澱和色譜方法將它們分離開來。
2.薄層色譜
薄層層析是快速分離和定性分析微量物質的一種極為重要的實驗技術,具有裝置簡單、操作方便而快速的特點。它是將固定相支援物均勻地鋪在玻片上製成薄層板,將樣品溶液點加在起點處,置於層析容器中用合適的溶劑而達到分離的目的。用此法分離時幾乎不受溫度的影響,可採用腐蝕性顯色劑,而且可在高溫下顯色,特別適用於揮發性小或在較高溫度下易發生反應的物質,同時也常用來跟蹤有機反應或監測有機反應完成的程度。
薄層層析的器材選擇:
(1)基板:玻璃、塑料、金屬箔,常用玻璃板。
(2)吸附劑:
吸附劑要有合適的吸附力,並且必須與劑和被吸附物質均不起化學反應。可用作吸附劑的物質很多,常用的有矽膠和氧化鋁,由於吸附性好,適用於各類化合物的分離,應用最廣。選擇吸附劑時主要根據樣品的溶解度、酸鹼性及極性。
氧化鋁一般是微鹼性吸附劑,適用於鹼性物質及中性物質的分離;而矽膠是微酸性吸附劑,適用於酸性物質及中性物質的分離。以下簡單介紹吸附劑的幾個基本引數。
種類:常用:氧化鋁(強極性)、矽膠(中強極性)
不常用:矽藻土、纖維素、醣類、活性碳
符號:h——無任何新增劑;g——加有鍛石膏(gypsum,caso4·1/2 h2o)粘合劑;
f——加有螢光素(fluorescein)
cmc——加有羧甲基纖維素鈉(carboxymethyl cellulose)
例:矽膠gf254表示矽膠中既加有煅石膏粘合劑,也加有螢光素,可以在波長254nm的紫外光下激發出螢光
粒度:目:1cm2內的篩孔數,數目越大,顆粒越小。薄層所用吸附劑顆粒較細,氧化鋁為200目,矽膠為100~150目。
μ:顆粒的平均直徑,以微公尺表示。例如:40μ的顆粒與100目相當。
活性:吸附劑按其含水量的多少各分為五個等級:i級含水量最少,活性最高;v級含水量最多,活性最低;但並不是活性越高分離效果越好,選用哪種活性級別的吸附劑,要用實驗的方法來確定。
酸鹼性:
市售氧化鋁有酸性(用以分離酸性化合物)、中性、鹼性(用以分離生物鹼等鹼性化合物),其蒸餾水洗出液的ph值分別為4、7.5、9—10;其中以中性氧化鋁應用最廣,可用來分離各種化合物,特別是那些對酸、鹼敏感的化合物。
矽膠沒有酸鹼性之分。
(3)劑
在樣品組分-吸附劑-劑三個因素中。對一確定組分,樣品的結構和性質可看作是一不變因素,吸附劑和劑是可變因素。而吸附劑的種類有限,因此選擇合適的劑就成為解決問題的關鍵。
劑的選擇有以下要求:
(a)對待測組分有很好的溶解度。
(b)能使待測組分與雜質分開,與基線分離。
(c)使後的組分斑點圓而集中,不應有拖尾現象。
(d)使待測組分的rf值最好在0.4~0.5,如樣品中待測組分較多,rf值則可在0.
25~0.75範圈內,組分間的rf值最好相差0.1左右。
由於薄層色譜法用途非常廣泛,國內外均有現成的鋪有吸附劑的薄層板**。一般實驗室中也可自己製備。
(e)不與組分發生化學反應,或在某些吸附劑存在下發生聚合。
(f)具有適中的沸點和較低的粘滯度。
劑的極性是指與樣品組分相互作用時。劑分子與吸附劑分子的色散作用、偶極作用、氫鍵作用及介電作用的總和。劑要根據樣品的極性及溶解度,吸附劑活性等因素進行選擇,總的原則是劑的極效能使組分的rf值在0.
5左右。常用溶劑極性次序是:石油醚《環己烷《苯《乙醚《氯仿《乙酸丁酯《正丁醇《丙酮《乙醇《甲醇。
如一種溶劑不能充分,可選用二元或多元溶劑系統。
4.槽與:
薄層的在密閉的容器即槽或稱為層析缸中進行。
:合適的劑用量為浸及下端矽膠,但不浸及樣點;點樣端向下,每次只一塊,放在正中,以免爬斜(進而傾斜)。
5.顯色:
如果化合物本身有顏色,就可直接觀察它的斑點。如果本身無色,可先在紫外燈光下觀察有無螢光斑點(有苯環的物質都有),用鉛筆在薄層板上劃出斑點的位置;對於在紫外燈光下不顯色的,可放在含少量碘蒸氣的容器中顯色來檢查色點(因為許多化合物都能和碘成黃棕色斑點),顯色後,立即用鉛筆標出斑點的位置。常用
普適性顯色劑:濃硫酸、碘蒸氣、螢光素,專用顯色劑:茚三酮、三氯化鐵溶液等。
三、實驗儀器與藥品
儀器:半微量玻璃儀器一箱,小燒杯,層析缸(槽),載玻片(100mm×25mm)乾燥器,電吹風,毛細管,移液管,研缽,布氏漏斗,抽濾裝置。
試劑:矽膠,1% cmc,石油醚(60~90℃),乙醇,丙酮,乙醚,飽和nacl溶液,無水na2so4
四、實驗步驟
1.製板:
將矽膠加 1% cmc,調成槳狀(矽膠:cmc=1:3~4)(在平鋪玻璃板上能晃動但不能流動),將其塗在載玻片上(100mm×25mm)),為使其坦平,可將載玻片用手端平晃動,至平坦為止,放在乾淨平坦的臺面上,晾乾之後放入105℃烘箱活化1小時,取出放入乾燥器內待用。
2、葉綠素的提取
在研缽中放入幾片(約5g)菠菜葉(新鮮的或冷凍的都可以.如果是冷凍的,解凍後包在紙中輕壓吸左水分)。加人10ml2:1石油醚和乙醇混合液,適當研磨。
將提取液用滴管轉移至分液漏斗中,加人10 ml飽和nacl溶液(防止生成乳濁液)除去水溶性物質,分去h2o層,再用蒸餾水洗滌兩次。將有機層轉入乾燥的小錐形瓶中,加2g入無水na2so4乾燥。乾燥後的液體傾至另—錐形瓶中(如溶液顏色太淺,可在通風櫃中適當蒸發濃縮)。
3、點樣
用一根內徑 1mm的毛細管,吸取適量提取液,輕輕地點在距薄板一端1.5cm處,平行點兩點,兩點相距1cm左右。若一次點樣不夠,可待樣品溶劑揮發後.再在原處點第二次,但點樣斑點直徑不得越過2mm。
4、 先在層析缸中放入劑[石油醚(60~90℃)-丙酮—乙醚(體積比為3:1:1)],加蓋使缸內蒸氣飽10min, 再將薄層板斜靠於層析缸內壁。
點樣端接觸劑但樣點不能浸沒於劑中,密閉層祈缸。待劑上公升到距薄層板另一端約1crm時,取出平放,用鉛筆或小針劃前沿線位置,晾乾或用電吹風吹乾薄層。
五、實驗注意事項
1.製板時用注意使板上矽膠厚度盡量一致。
2.植物葉片不要研成糊狀,否則會給分離造成困難
8樓:匿名使用者
1.提取
(1)稱取五克的綠葉,剪碎放入研缽中.
(2)向研缽中放入少許二氧化矽和碳酸鈣,再加入10ml無水乙醇,進行充分研磨
(3)將研磨液迅的倒入玻璃漏斗中進行過濾.將濾液收集到試管中及時用綿將試管口塞嚴.
葉綠素的提取和分離實驗步驟
9樓:匿名使用者
提取:(1) 取菠菜或其他植物新鮮葉片4-5片(2g左右),洗淨,擦乾,去掉中脈剪碎,放入研。(2) 研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊狀,再加10-15ml 95%乙醇,離心35min,提取上清液過濾於三角瓶中,殘渣用10ml 95%乙醇沖洗,一同過濾於三角瓶中。
(3) 如無新鮮葉片,也可用事先製好的葉乾粉提取。取新鮮葉片(以菠菜葉最好),先用105℃殺青,再在80℃下烘乾,研成粉末,密閉儲存。用時稱葉粉2g放入小燒杯中,加95%乙醇20-30ml 浸提,並隨時攪動。
待乙醇呈深綠色時,濾出浸提液備用。分離:(1) 取圓形定性濾紙一張(直徑11cm),將其剪成濾紙條(9cm×3cm),用滴管吸取乙醇葉綠體色素提取液,沿紙條的長度方向塗在紙條的一邊(距邊約1cm),使色素擴散的寬度限制在0.
5cm以內,風乾後,再重複運算元次。 (2) 在層析缸中加入適量的推動劑,將濾紙條帶有色素的一端插入層析缸中,使濾紙條下端浸入推動劑中。迅速蓋好層析缸蓋。
此時,推動劑借毛細管引力順濾紙條向上擴散,並把葉綠體色素向上推動,不久即可看到各種色素的條帶。 (3) 當推動劑前沿接近濾紙邊緣時,取出濾紙,風乾,即可看到分離的各種色素:葉綠素a為藍綠色,葉綠素b為黃綠色,葉黃素為鮮黃色,胡蘿蔔素為橙黃色。
用鉛筆標出各種色素的位置和名稱。
在做葉綠素的提取和分離實驗中,在葉綠素的提取和分離實驗中,無水乙醇的作用是,二氧化碳的作用是,碳酸鈣的作用是,
當層析液擴散到濾紙條頂部時,就不再進行擴散,所以各種色素的擴散也隨之停止。他們運動的時間肯定一樣 x vt 所以速度越快x越大 又因為運動速度和色素的溶解度成正比,所以就算時間再充裕,最上面的也是胡蘿蔔素 色素帶整體都會往上移,但是葉綠素a的帶是趕不上胡蘿蔔素的,兩者的距離是都差不多的 擴散到頂端以...
葉綠素提取分離實驗的層析液成分是什麼
下面四種都可復做層析 製液 1 20份汽 油 2份丙酮 bai2份石油醚 1份苯du。將濾紙條直zhi接用該層析dao液進行層析,就可以得到比較理想的效果。2 9份體積分數為95 的酒精和1份苯混合。3 汽油或四氯化碳加少許無水硫酸鈉。4 體積分數為95 的酒精或93號汽油。葉綠素中色素的提取和分離...
下列關於「綠葉中色素的提取和分離實驗」的敘述不正確的是
a 無水乙醇和丙酮等有機溶劑能提取色素,a正確 b 不同色素在層析液中的溶解度不同,進而分離色素,b正確 c 在研缽中加入二氧化矽 碳酸鈣 無水乙醇和綠葉後,用杵棒快速研磨,c錯誤 d 實驗結果中得到的濾紙條上最寬的色素帶是葉綠體a,呈現藍綠色,d正確 故選 c 下列關於 葉綠體中色素的提取和分離 ...