1樓：匿名使用者
菌液pcr有風險，因為pcr是有乙個級聯放大的效應在裡專面，只要在菌液屬中沾了一點轉化時用的核酸片段，就有可能會擴增出來。但是送去測序的時候，很可能是假陽性，沒有連入任何片段（以前我們就碰到過這種情況，而且還是通過藍白斑篩選的）。
如果實在沒有iptg和x-gal，也最好能先挑幾個單菌落去做菌落pcr，從中選取陽性的菌落去做液體搖菌，提質粒，找乙個目標判斷上有的酶做乙個單切，同時用自連的空載作為對照，看是否能夠切開。如果菌體轉殖切開了，空載切不開，才能說明找到了陽性轉殖。送去測序才比較可靠。
否則直接送去測序，很可能全是空載，白白耽誤時間。
為了節省時間，也可以先送去測序，等待測序的過程中，進行酶切驗證，對了更好，不對趕緊找其他的菌去送樣。
構建啟動子載體遇到了困難，總出現假陽性的轉殖，菌液pcr檢測不到目的片段卻可以檢測到gus片段
2樓：小學生
我想這是因為你的啟動子檢測載體設計的不合理造成的，你可以在啟動子前而加乙個轉錄終止子，以阻止這種假陽性訊號。
還有乙個原因是：如果是原核生物，啟動子本來就只有幾十甚至十幾個bp，pcr檢測不到很正常。
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