1樓：匿名使用者
基因和microrna有多個結合位點
合生基因構建的mirna sponge抑制載體，經特異地優化設計，增強吸附能力的同時增加了更多的結合位點，這樣提高了成熟mirna或sirna抑制能力，消弱細胞中mirna或sirna導致的基因沉默效應，從而進行mirna或sirna功能缺失性研究。
最近進行課題設計，想驗證一下microrna和**的靶基因是否結合。同時在靶基因3『-utr區的snp是否影響它們的關係。這個snp位點在種子區，推測也具有一定功能。
第一步想轉殖microrna到表達載體，同時轉殖3』-utr區（包括野生型和突變型）到pgl-3 control 螢光素酶基因下游，雙轉細胞後，利用螢光素酶報告系統檢測兩者是否結合，snp位點是否影響結合。
請問具體的實驗設計：
選取什麼細胞系進行實驗，是靶基因和mirna內源表達高的，還是低的。細胞系的基因型是否影響實驗結果？
2.我選用的載體是否合適，mirna如果已有慢病毒的表達載體（商品），是否可以直接利用，還是需要重新做？pgl-3 control是否可以？
有無合適的位點供轉殖，只發現xbai。內對照用pgl-tk,因為不是很熟悉這套載體，不知選的是否合適。
3.如果驗證成功，還需什麼實驗佐證，後續的功能研究如何進行？是否也需要用rnai的方法抑制靶基因表達，再轉入野生型和突變性兩種基因，看效果？
關於酶與ATP的敘述正確的是A轉錄時，RNA聚合酶能與mRNA的啟動部位相結合B酶的形成需要消耗AT
a 轉錄時，rna聚合抄酶與基因的啟 bai動子部位相結合，a錯誤 b 酶du是大分子物質，合成時需要atp供能zhi，細胞dao中的代謝需要酶催化，包括atp的合成和分解，b正確 c atp沒有高效性和專一性，c錯誤 d 酶在催化過程中形狀會發生改變，催化結束後會恢復原狀，d錯誤 故選 b rna...
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