1樓:網友
要不要我幫我們教科書給你,很全面。
薄層層析實驗中,為什麼要計算
2樓:小臧學長
為了準確算出實驗資料,更好的用量使用之間相互反應rf=a/b,rf=溶質移動的距離/溶液移動的距離。表示物質移動的相對距離。各種物質的rf隨要分離化合物的結構,濾紙或薄層板的種類、溶劑、溫度等不同而不同,但在條件固定的情況下,rf對每一種化合物來說是乙個特定數值。
薄層層析可根據作為固定相的支援物不同,分為薄層吸附層析、薄層分配層析、薄層離子交換層析、薄層凝膠層析等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
英文為thinlayerchromatography又稱薄層色譜,色譜法。
中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用於少量樣品(幾微克,甚至微克)的分離;另漏橡埋一方面在製作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精製樣品,此法特別適用於揮發性。
較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物質。是將吸附劑、載體或其他活性物質均勻塗鋪在平面板(如玻返螞璃板、塑料片、金屬片如高等)上,形成薄層(常用厚度為公釐左右)後,在此薄層上進行層析分離的分析方法。
薄層層析中常見的問題有哪些?
3樓:心安是福
拖尾現象產生之原因及解決方法:
1、點樣量太多,劑不能全部負載。
解決方法:尋出合適之點樣量後,再拿橡進行層析。
2、劑ph值偏高。如以中性劑層析酸性物質時,常形成斑點拖尾。
解決消銀旁方法:在劑中加入酸,使解離受到抑制,即可防止斑點拖尾。
3、劑的ph值偏低。如以中性劑層析生物鹼和其它弱鹼時,常觀察到斑點拖尾。
解決方法:在層析k值在10-3~10-8的鹼性化合物時,劑應調至鹼性(如加入吡啶、二乙胺等)。
4、吸附劑ph的影響。 由於化合物與薄層上的酸、鹼成鹽而產生拖尾現象。
解決方法:換用ph合適的吸附劑或調整劑的ph,如加入酸或鹼等。
5、吸附劑和劑中痕跡量的金屬離子(如ca2+、mg2+等),使層析後的斑點形成拖尾。特別是被的化合物具有-cooh及酚-oh等基團時。
解決方法:採用純淨的酸搏纖來洗滌和處理吸附劑。劑可用精製的方法來除去金屬離子。
擴充套件資料:薄層色譜法的優點:
它保持了操作方便、裝置簡單、顯色容易等特點,同時速率快,一般僅需15~20分鐘;混合物易分離,分辨力一般比以往的紙層析高10~100倍。
它既適用於只有0.01μg的樣品分離,又能分離大於500mg的樣品作製備用,而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點是對生物高分子的分離效果不甚理想。
如何獲得高質量的薄層層析
4樓:
摘要。您好,個人總結了幾點:首先是層析條件的選擇,包括薄層板、劑的選擇等。
這個說起來就太多了,多參考一些資料都可以的。其次是操作,主要是點板和跑版。點板時要選擇適當的位置,一般為離邊沿1-1。
5cm為宜。點樣直徑一般為3-5mm,點樣距離為。一般為圓點狀,劑量大時亦可點成條帶狀,長度不超過1cm。
點樣點想要足夠小,需要有耐心,採用少量多次點樣,並迅速用洗耳球吹乾溶劑,防止斑點擴大,必要時可用吹風筒。
為方便點樣,在供試品溶解時溶劑的選擇也是很重要的,在有選擇的情況下,可選擇揮發性強,粘度大的溶劑,這樣可以減小點樣點的擴散。接著就是跑板,在點好樣後,前薄層板放入缸內預飽和15-30min,這樣可防止邊緣效應的產生,使色譜更漂亮。
展距要適中,確保rf值在之間。
如何獲得高質量的薄層層析。
其次是操作,主要是點板和跑版。點板時要選擇適當的位置,一般為離邊沿1-1。 5cm為宜。
點樣直徑一般為3-5mm,點樣距離為。一般為圓點辯飢狀,劑量大時亦可點成條帶狀,長度不超過1cm。 點樣點想要足夠小,需要有耐心,採用少量多次點樣,並迅速用洗耳球吹乾溶劑,防攜空返止斑點擴大,必要時可用吹風筒。
為方便點樣,在供試品溶解時溶劑的選擇也是很重要的,在有選擇的情況下,可選擇揮發性強,粘度大的溶劑,這樣可以減小點樣點的擴散。接著就是虧培跑板,在點好樣後,前薄層板放入缸內預飽和15-30min,這樣可防止邊緣效應的產生,使色譜更漂亮。 展距要適中,確保rf值在之間。
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薄層層析的原理是什麼,薄層層析法的原理
5樓:過異的人
1.薄層層析法也叫薄層色譜法,是以塗布於支援板上的支援物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑑定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物鹼及其他多種物質的特別有效的層析方法。
2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相流過固定相的過程中,連續的產生吸附、解吸薯頌附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
3.薄層層析可根據作為固定相的支援物不做手昌同,分為薄層吸附層析、薄層分配層析、薄層離子交換層析、薄層凝膠層析等,一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
4.物質分子之所以能在固體表面停留,這是因為固體表面的分子和固體內部分子所受的吸引力不相等,吸純扒附過程是可逆的,被吸附物在一定條件下可以解吸出來,吸附層析過程就是不斷地產生平衡和不平衡、吸附和解吸的動態平衡過程。
薄層層析的原理是什麼,薄層層析法的原理
6樓:華源網路
1.薄薯頌層層析法也叫薄層色譜法,是以塗布於支援板上的支援物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑑定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸純扒、生物鹼及其他多種物質的特別有效的層析方法。
2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相流過固定相的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目做手昌的。
3.薄層層析可根據作為固定相的支援物不同,分為薄層吸附層析、薄層分配層析、薄層離子交換層析、薄層凝膠層析等,一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
4.物質分子之所以能在固體表面停留,這是因為固體表面的分子和固體內部分子所受的吸引力不相等,吸附過程是可逆的,被吸附物在一定條件下可以解吸出來,吸附層析過程就是不斷地產生平衡和不平衡、吸附和解吸的動態平衡過程。
薄層層析法原理
7樓:竇雁釗楓
薄層層析又叫薄層色譜,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用於少量樣品(幾到幾微克,甚至微克)的分離;另一方面在製作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精製樣品,此法特別適用於揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種「預試」。
薄層色譜(thin
layerchromatography)常用tlc表示,又稱薄層層析,屬於固-液吸附色譜。是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面適用於小量樣品(幾到幾十微克,甚至的分離;另一方面若在製作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。
因此又可用來精製樣品。故此法特別適用於揮發性較小或在較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。
薄層色譜是在被洗滌乾淨的玻板(10×3cm左右)上均勻的塗一層吸附劑或支援劑,帶乾燥、活化後將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加於離薄層板一端約1cm處的起點線上,涼幹或吹乾後置薄層板於盛有劑的槽內,浸入深度為。待劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,乾燥後噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
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