1樓：化晴子
你的目的就是要製造乙個中頻重複片段是吧？
那麼你的兩端的酶切位點是什麼呢？還有你想獲得的是同向的重複序列還是隨機方向的重複序列呢？如果是隨機方向的重複序列，那比較方便，即補平末端加連線酶長時間做平頭連線即可獲得重複序列。
如果不是的話，那麼就很難達到你要的目的了。
2樓：
可以再具體描述一下你的實驗嗎？這樣才能找到你要的文獻。
3樓：匿名使用者
是否可以這樣:在兩頭再接上相同序列,做成平頭的,如下(n 為原序列)5'cgtacnnnnnnncgtac3'
3'gcatgnnnnnnngcatg5'
然後拿去跑pcr,以自身解鏈所得單鏈為引物,退火(可能)得到的部分產物
5'cgtacnnnnnnncgtac3'
___________3'gcatgnnnnnnngcatg5'
能得到延伸,其餘產物不變,經一次迴圈後可能能得到少量5'cgtacnnnnnnncgtacnnnnnnncgtac3'
3'gcatgnnnnnnngcatgnnnnnnngcatg5'
學生我只是不久前學了點基因工程,無任何實際經驗,如果這種方法算是天方夜談的話,大家聊作看笑話吧...
分子生物學問答題總結
分子生物學的問題
4樓：o唱反調
依本人的淺解:基因內都是dna跟rna兩種 前者是脫氧核苷酸 後者是核糖核苷酸組成 統的來說就是核酸. 功能如何啊 - - 那當然是把遺傳啦 dna可以轉錄成rna rna再翻譯成蛋白質 蛋白質是生物形狀的表現者 這樣就聯絡著下一帶的有上一帶的特徵.
嘻 毛皮 希望大家別見笑
5樓：
第乙個問題太廣了，有很多角度來回答．不知道從哪方面說起了．rna有三種,信使rna,轉運rna,蛋白rna信使rna:傳遞遺傳資訊
轉運rna:轉運蛋白質
蛋白rna:蛋白質內含有的rna.
求助分子生物學問題
6樓：匿名使用者
1rna為單鏈，其結構不穩定，較易變性，故提取時應注意。
2（1)提取真核生物dna用鳥槍法獲得其目標dna，（2）用相同的dna內切酶處理大腸桿菌質粒。
（3）將目的dna與大腸桿菌質粒在dna連線酶種處理，使得兩者結合。
4真核生物其mrna形成需要加工，真核生物先形成hnrna，經過加工後形成mrna，兒原核生物則沒有加工過程。
5你可以用dnaman這個軟體幫助設計，將你所要的鹼基順序輸入，在用其pcr引物設計，就可以了。
7樓：匿名使用者
1.周圍環境中的rnase相當多，而且很難降解，就算高溫高壓滅菌也不一定能清除乾淨，因此分離純化rna時使用的槍頭，離心管都必須是rnase free的，如果沒有，就要自己用depc處理以後再使用，最好使用的槍也是單獨一套不要跟提取dna的槍混用以防止rnase汙染，切記不能裸手觸控槍頭、離心管等物品。
2.看你要轉殖什麼區域了，如果是orf區，最好從cdna文庫裡擴增，片段如果比較大，一定要選用品質好一點的高保真酶，擴增迴圈數不用太多，以防止出現突變。如果是其他區域要抽提genomic dna，但是擴增以後要用切膠**，以防止genomic dna汙染。
3.如果出現非特異條帶可以提高退火溫度試一試，一般出現這個情況有可能是設計引物的問題，模板不好也有可能
4.原核表達一般用於比較簡單的不需要複雜加工的蛋白，因為原核表達系統裡沒有這些加工元件，而真核表達系統多用於表達有複雜結構或比較大的蛋白
5.你這個問題太不專業了，你要擴增多大的序列用於表達，用什麼載體？什麼酶切位點？這些都是設計引物所必須考慮的
8樓：匿名使用者
3.出現非特異條帶的原因有:1.引物錯誤(序列較短 引物內部或引物間有互補序列)2.復性溫度太低
解決方法:1.重新設計引物2.摸索最佳復性條件
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廣義上 分子生物學包括對蛋白質和核酸等生物大分子結構與功能的研究 以及從分子水平上闡明生命的現象和生物學規律。狹義概念 既將分子生物學的範疇偏重於核酸 基因 的分子生物學，主要研究基因或dna結構與功能 複製 轉錄 表達和調節控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關的蛋白質和酶的結構與功能的研究。現代...
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