1樓:魚骨頭愛游泳
要考慮目的基因在細胞中表達,直接匯入目的基因無法表達,沒有表達即轉錄相關的原件,而載體具有!
2樓:123來不及
細胞中外來的dna一般都會被降解掉,而且,就算進到細胞中,還要能複製,能表達才行。載體是自然條件下可以進入細胞,並且能夠複製和表達的dna,所以必需要借助載體才能進入受體細胞。
pcr只能擴增基因片段,並不能表達,目前還沒有脫離細胞進行的表達過程。
3樓:靜軒散人
首先pcr利用的是dna在不同溫度下的變性和復性,與在細胞中的複製是不一樣的。
*************************===就像你說的,用到質粒的原因實際上就是啟動子,終止子,複製原點和標記基因,如果目的基因上有了他們很可能就不用質粒了,可是目的基因上可能有這些東西都有嗎?
事實上質粒上的啟動子和終止子也是後來做上去的,因為它需要適合受體細胞,能讓受體細胞識別。
4樓:匿名使用者
對的,不一定需要載體。
只要你p出來的片段是完整的,外界條件適當,啟動子響應,啟動子下游的目的基因(orf)就有機會轉錄表達出來。(pcr-->切膠**-->轉化-->篩選) (注意是有機會!機會是否比載體匯入的大,不一定。
)通重載體匯入的好處,一是量產;二是有篩選基因方便挑選transformants;三是方便下游的鑑別。
5樓:匿名使用者
游離的dna進入細胞體,一般會直接被分解,就算可以進行轉錄——翻譯成蛋白,游離dna也無法跟著細胞**進行複製,導致子代細胞中不再含有目的基因,也就是說,你費力將基因匯入受體細胞,結果只有乙個細胞被改變了,整個群體細胞菌落不會有可觀察的任何變化.
而將基因接入載體,由於載體可以在細胞內複製,隨著細胞**,載體會帶著目的基因存在於每個子代細胞中,最終整個菌落發生可以觀察到的變化,基因工程才有意義.
基因工程是乙個巨集觀提取——微觀改造——巨集觀檢驗的過程,就是依靠各種載體實現的
將目的基因匯入受體細胞的方法有那些
常用方法 基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌,枯草桿菌,土壤農桿菌,酵母菌和動內植物細胞等。其中容,對於細菌或植物細胞,常用質粒作為載體將目的基因匯入細胞內 動物細胞則用顯微注射的方法將目的基因匯入動物受精卵的雄性原核中。過程 用人工方法使體外重組的dna分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染...
為什麼從基因文庫中提取目的基因時不需
限制酶主要是從原核生物中分離出來的。到目前為止,細菌是限制酶,尤其是特異性非常強的i類限制酶的主要 限制作用實際就是限制酶降解外源dna 維護宿主遺傳穩定的保護機制。具有限制酶的細菌有一定的防禦病毒侵染的能力,因為如果侵入細菌的病毒dna或rna中有該酶識別的序列,就會被切割,從而保護了細菌本身的d...
基因工程中為什麼目的基因在不同物種中均能成功表達
您好!首先,並不是所有基因都能在任何物種中表達,比如細菌中革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌,原核生物與真核生物,動物與植物之間,很多基因都無法交換表達,因為基因表達過程分為轉錄和翻譯兩個過程,一般來說轉錄沒什麼問題,但是翻譯這一步涉及到很多調控,調控原件不匹配完全不表達都很常見 此外還涉及到翻譯之後的修飾...