1樓:秋風
k-b紙片瓊脂擴散法原理:又稱圓筒平板法(cylinder plate method)。用於測定抗生素效價的生物學定量方法之一。
標準的方法是以20毫公升的瓊膠培養基放入陪替氏培養皿內做成平面,上面加上預先培養的試驗標準菌種,例如摻入了葡萄球菌的瓊膠4毫公升,而使之凝固,上面再放上乙個外徑8公釐的不鏽鋼圓筒,筒內倒滿青黴素稀釋液之後,在35—37℃培養12—16小時。由於圓筒周圍產生濃度梯度,葡萄球菌的繁殖被阻止於有效濃度範圍之內而形成圓形的透明帶。其直徑d與青黴素濃度c之間的關係如下式所示:
d=klog10c+a(k、a為常數)
與標準青黴素液相比較,可求得青黴素濃度。測定鏈黴素時用枯草菌,氯黴素用大腸菌,四環素用八連球菌作繁殖試驗。此外還有用圓形濾紙代替圓筒,使被檢液滲入的濾紙法。
影響因素包括:
1培養溫度、時間、培養基的成分、ph、離子濃度等;
2機體內的生態環境;
3環境中不利於細菌生長的物質,如藥物、抗菌藥物、抗體、過高的鹽份等。
2樓:匿名使用者
k-b紙片瓊脂擴散法原理:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上。紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解後不斷地向紙片周圍區域擴散形成遞減的梯度濃度。
在紙片周圍抑菌濃度範圍內測試菌的生長被抑制,從而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度,並與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(mic)呈負相關關係,即抑菌圈愈大,mic愈小。 影響紙片法藥敏試驗結果的因素有:
1培養基的質量,如ph、深度、硬度和表面濕度等。對每批商品化或自配mh瓊脂必須用標準質控菌株進行檢測,合格後方能使用;2藥敏紙片的質量,含藥量和儲存方式;3接種菌量正確與否是影響結果的重要因素之一,取決於麥氏比濁標準的配製,正確使用和儲存;4試驗操作質量;5孵育條件,溫度和時間;6抑菌圈測量工具的精度;7質控標準菌株本身的藥敏特性是否合格,有無變異。