1樓:南京金益柏生物科技****
我曾經bai做過,細胞用超聲
低溫du裂解後離心得到上zhi
清。我用超聲dao低溫裂解細胞的,然後回離心答得到上清做elisa建議用流式檢測,不要用elisa法。
但是檢測胞內蛋白時,需要先固定打孔細胞,然後再標記螢光素偶聯抗體,這時抗體就可以進入細胞內從而檢測胞內蛋白。
如調節性t細胞的特異轉錄因子foxp3,細胞訊號轉導過程中的一些活化的激酶等都可以用流式的方法檢測。
2樓:
既然能做考染 不就直接跑western麼。。。 就可以用內參歸一化了 elisa的話直接測下總蛋白濃度呢 雖然一般都不太準
請教:測細胞內蛋白的elisa怎麼做
3樓:南京金益柏生物科技****
一般來說檢測細胞內的蛋白質需要
破碎細胞,非結構蛋白較易提取,破碎細胞後離心取上清即可。而結構性蛋白則需破碎脂膜提取蛋白,具體方法可參照膜蛋白提取的相關文獻。提取的總蛋白需定量,然後以每mg或g的蛋白的相同濃度稀釋後用於測定。
提取時注意要保持低溫及加入必要蛋白酶抑制劑(protease inhibitor)。
蛋白質的跨膜運輸方式有哪些，細胞內蛋白質的跨膜運輸有哪幾類
1，協助擴散與主動運輸的區分標準是不是濃度梯度 協助擴散和主動運輸都屬於載體介導的跨膜運輸方式，它們之間的關鍵區別在於實現跨膜轉運是否需要能量。協助擴散的動力來自於濃度梯度，故不需要能量。而主動運輸因為一般是逆濃度梯度或電化學梯度進行跨膜轉運，所以需要能量，其運輸過程所需能量 有三種 atp直接供能...
為什麼蛋白質在細胞內水解成氨基酸
蛋白質是一種複雜的有機化合物，舊稱 朊 ru n 氨基酸是組成蛋白質的基本單位，氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子，每一條多肽鏈有二十至數百個氨基酸殘基 r 不等 各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質的氨基酸序列是由對應基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本...
所有生物的體細胞內都有染色體嗎，正常體細胞內的染色體含有染色單體嗎
對，來都有！病毒是介於生物與非自生物之間的，是由蛋白質和核酸組成的。核酸是主要遺傳物質，只不過沒有真核生物染色體那樣的等級結構。原核生物是具有核區，核酸分子與少量蛋白質相結合，習慣上也稱為染色體。真核生物就不用說了，一定有染色體！真核生物才有,原核生物沒有,真核生物與原核生物的區別就在於此,另外病毒...